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美国GENMED品牌产品由国际优秀留美博士团队创建的生物医药科技企业。公司总部位于美国生物医药之谷波士顿地区。公司创办人在美国深造、研究、工作和创业十三余年,曾任美国哥伦比亚大学肿瘤遗传研究院的研究员,负责主持美国卫生部、农业部和能源部的多项重大科技项目。
美国GENMED品牌主营业务包括有:细胞培养(Cell Culture)试剂技术、分子技术、蛋白化学技术、免疫抗体技术、医学技术、生物化学技术、模式生物技术、微生物技术、植物技术、载体技术、毒理技术、营养技术、平台技术、生物分类学(taxonomy)分析技术等20余项,详细的项目可以咨询在线客服!
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文献和实验【目的要求】 1. 掌握比色分析法和分光光度法基本原理、标准曲线的制作及使用,标准管法结果计算 2. 熟悉蛋白质含量测定常用方法、原理及应用 3. 了解常用可见光、紫外分光光度计 的测定原理及使用 【教学内容】 1. 酚试剂法蛋白质含量测定 Lambert-Beer定律,比色分析法和分光光度法基本原理, 722型分光光度计使用,常用蛋白质含量测定方法及应用,酚试剂法测定蛋白质含量原理、操作, 标准曲线的制备及使用 2. 双缩脲法蛋白质含量测定
呈色的强度取决于反应中酶结合物的浓度和加入竞争抑制物的量。 竞争法 ELISA 不易用自视判断结果,因肉眼很难辨别弱阳性反应与阴性对照的显色差异,一般均用比色计测定,读出 S、P和 N 的吸光值。计算方法主要也有两种,即阳性判定值法和抑制率法。 a. 阳性判定值法 与间接法和夹心法中的阳性判定值法基本相同,但在计算公式中引入阳性对照 A 值,现举某种检测抗 HBc 的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照为不含抗 HBc 的复钙人血浆,阳性对照中抗HBc含量为 125±1 00u/ml。每次试验设
试剂,充分混合,放置2min 后用1cm 光径比色杯在595nm 下比色,记录光密度OD 595 nm,并通过标准曲线查得待测样品提取液中蛋白质的含量X(μg)。以标准曲线1 号试管做空白。 五、结果计算 式中:X 为在标准曲线上查得的蛋白质含量(μg)。 六、附 注 1.Bradford 法由于染色方法简单迅速,干扰物质少,灵敏度高,现已广泛应用于蛋白质含量的测定。 2.有些阳离子,如K
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