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核酸外切酶Ⅲ

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  • 2025年07月11日
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    核酸外切酶Ⅲ(Exonuclease Ⅲ)作用于双链DNA,沿3'-OH末端方向,逐步切去单核苷酸。该酶的最适底物为平末端或5'末端突出的DNA,也可作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此该酶难以切割3'突出末端。 该酶对底物的消化程度随3'突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端难以被切割。这种特性可用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平末端或5'突出端),此时核酸外切酶Ⅲ将仅消化一条链。 核酸外切酶Ⅲ的活性部分依赖DNA双螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。此外,该酶也有RNase H、3'-磷酸酶、脱嘌呤/嘧啶(AP)位点特异性核酸内切酶活性。

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