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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
250 mg
| ■ 制品说明 |
| X-alpha-Gal |
| X-alpha-Gal是酵母半乳糖苷酶(MEL1)的显色底物,可在琼脂上直接检测基于GAL4的酵母双杂交互作。 X-alpha-Gal实验检测MEL1基因的激活,该基因受GAL4调控,用于酵母双杂交的筛选。MEL1编码的分泌型的α-半乳糖苷酶可水解无色的X-alpha-Gal成蓝色产物。响应阳性双杂交互作的酵母克隆表达α-半乳糖苷酶,在含有X-alpha-Gal的培养基上呈蓝色。 |
| ■ 制品特点 |
| 1. 有阳性互作的酵母克隆呈蓝色 2. 在培养板上直接显色,无需裂解细胞 |
| ■ 制品用途 |
| 酵母双杂交研究(Matchmaker Gold) |
| ■ 文献 |
| 1. Aho, S. et al. (1997) Anal. Biochem. 253:270–272. 2. Liljestrom, P. L. (1985) Nucleic Acids Res. 13:7257–7268. |
| ■ 携带MEL1基因的酵母菌株 |
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| 注释:响应阳性双杂交互作的酵母克隆表达α-半乳糖苷酶,在含有X-alpha-Gal的培养基上呈蓝色。 |
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文献和实验苷。 分子式为C14分子式为H15BrClNO6,分子量为408.63,CAS Number 7240-90-6。 X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。 X-gal买来的时候是固体 你可以按照《分子克隆》的附录配制成液体
Replication timing by density transfer
, leu2-3,112, ura3-52, his6 in an A364A background. I aim for about 32 x 106 cells per time point. That gives enough DNA for at least 3 blots, leaving enough leeway for errors. 2. When the cell density is 2 x 106 cells/ml (OD660 ~ 0.16
法将cDNA 文库质粒转化到酵母菌Y187中,SD – Leu平板上30 ℃培养3~5 天,菌落长出。 5.酵母交配转化及阳性克隆的筛选 将酵母菌Y187/ pGADT7-cDNA与酵母菌Y2HGold/pGBKT7- CaM进行酵母交配转化(Yeast Mating),SD–Trp/-Leu/Aba/X-α-gal平板上30 ℃培养3~5 天,筛选蓝色菌落,再将阳性克隆在SD–Trp/-Leu/-His/-Ade/Aba/X-α-gal平板上进行验证
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