- ￥24286
- 罗氏Roche（KAPA）
- 09052488001（）
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
92
- 英文名：
KAPA HyperChoice MAX 0.5Mb T4， 24 rxn
- 供应商：
上海博耀商贸有限公司
- 规格：
24
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文献和实验要用新鲜的TAE buffer，染EB也要用双蒸水EB溶液，避免污染。 4）最后做连接之前，把insert和vector各取2ul跑胶，看一下条带的亮度和size，如果都没有问题，可以进行连接反应。关于连接反应，我用的是NEB的T4 Ligase系统，我喜欢一个克隆设置3个反应，即insert分别为0ul，1ul和2ul。vector均为2ul，总体系10ul，室温下放置24小时候转化（老板说只要4个小时就可以转化，但是我没有试过），过夜孵育后观察克隆形成情况，快速胶检，一般都会得到阳性
含有这两种酶切位点序列。 已经开始进行ta克隆 如楼上战友所述，TA克隆的确是长片段亚克隆的好的手段。我最初开始学习构建质粒的时候也是先上TA，不过我们实验室一直使用一种KAPA HIFI readymix的酶，效果很好，保真性也非常非常高，就是做TA的时候比较麻烦，需要把PCR产物纯化回收后再加一次A tail，而就是这一步我感觉一直没有摸索到最优化稳定的条件，所以每次加A后连pCR2.1 转化的结果都不稳定，有时候长的多有时候长得少，之前曾经就这个问题发帖
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snRNA 的环 I 锚定，而内含子的 5ʹ剪接位点（5ʹSS）和分支点序列分别被 U6 和 U2snRNA 特异性识别。除了催化金属离子的配位作用外，Prp8 催化空腔中的 RNA 元件大多为催化作用做好了准备。催化潜伏阶段由包围 BPS 的 SF3B 复合物以及掩盖 5ʹ外显子- 5ʹSS 连接的剪接因子 Cwc24 和 Prp11 维持。这个结构与前面确定的结构一起勾勒出了前 mRNA 剪接反应的分子框架。 Bact 复合物的催化潜伏期（图片来源：Science） 3. Structure
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