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2ug
pC-YFP载体pC-YFP质粒pC-YFP图谱是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。pC-YFP载体pC-YFP质粒pC-YFP图谱带有一个或一个以上的选择性标记基因和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列pC-YFP载体pC-YFP质粒pC-YFP图谱去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作。
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文献和实验*发表【中文论文】请标注:由上海酶研生物科技有限公司提供;
*发表【英文论文】请标注:From Shanghai EK-Bioscience Biotechnology Co., Ltd.
superskyfly 我自己都觉得我自己很牛,千百人都做出来的试验,我就是做不出来。质粒用的是Promega p4.32-NF-kB-Luc, 转染用的是Invitrogen的Lipofactamin, 激活用的是Sigma生产的PMA和PHA-P,Assay用的是Promega dual,结果加了PMA和PHA的和不加的读数几乎没有区别。加了compound的和不加的也没有区别。 用过PC3, Jurkat, A549,HCT116都是一样。
步骤 1. 载体的构建 pA7- CFP- AtCOP1,pA7-AtCRY1-YFP pA7- CFP-OsCOPl,pA7-OsCRY1b-YFP 中间载体pA7-CFP和pA7-YFP为本实验室构建。将AtCOPl(引物为AtCOP1XhoI5' 和AtCOP1 SpeI3')和AtCRYl(引物为AtCRY1XhoI5'和AtCCT1SpeI3')分别用高保真聚合酶(pfu ultra)进行PCR扩增,纯化PCR产物,用XhoI/SpeI双酶
derived monoclonal antibodies, XH1 and XH2, to compete with the well-characterized ZO-1 anti-YFP1 antibody for binding to the target antigen YFP1; hypothetical antibody PC10 is used as a control. First, 96-well plates are coated with the YFP1 antigen
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