- ￥1500
- EK-Bioscience
- MMY1159
- 2025年11月03日
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2ug
pN-YFP载体pN-YFP质粒pN-YFP图谱是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。pN-YFP载体pN-YFP质粒pN-YFP图谱带有一个或一个以上的选择性标记基因和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列pN-YFP载体pN-YFP质粒pN-YFP图谱去掉了大部分非必需序列，使分子量尽可能减少，以便于基因工程操作。
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文献和实验*发表【中文论文】请标注：由上海酶研生物科技有限公司提供；
*发表【英文论文】请标注：From Shanghai EK-Bioscience Biotechnology Co., Ltd.
步骤 1. 载体的构建 pA7- CFP- AtCOP1，pA7-AtCRY1-YFP pA7- CFP-OsCOPl，pA7-OsCRY1b-YFP 中间载体pA7-CFP和pA7-YFP为本实验室构建。将AtCOPl(引物为AtCOP1XhoI5' 和AtCOP1 SpeI3')和AtCRYl(引物为AtCRY1XhoI5'和AtCCT1SpeI3')分别用高保真聚合酶(pfu ultra)进行PCR扩增，纯化PCR产物，用XhoI/SpeI双酶
时效率最高 [2，3] 。在设计钙变色子时，用 GFP 突变体作为两个伙伴荧光团：蓝绿色荧光蛋白作为给体，而黄色荧光蛋白作为受体（见图4.1 ; 参考文献 [4])。如果两个荧光团融合于不同的作用伙伴，分子间 FRET 可以用来探测蛋白质-蛋白质相互作用，而如果两个荧光团都融合到同一个蛋白质，分子内 FRET 可用来探测蛋白质剪切和构象变化 [3] 。 4.1.2 钙变色子的一般设计 使用分子内 FRET 的概念，钙变色子由夹在 CFP 和 YFP 之间的，前后融合的 CaM 的 N
总有同学分不清荧光与萤光的概念，导致犯了很低级的错误，例如有人问我，为什么我把pGL转染细胞，荧光显微镜下看不到荧光那？又比如 做双荧光素检测时能不能用酶标仪检测，或者该用什么仪器测那？这都是分不清荧光与萤光的区别导致的。本文只给刚入门的师弟师妹看，大神们不要笑话。 荧光，英文fluorescence，是指绿色荧光蛋白以及其变体（EGFP,CFP,ECFP,YFP,EYFP,DsRED等等）在收到激发后发射出的特定频率的光，这是一个生物物理反应，类似于我们高中物理学的什么基态啦，跃迁
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