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AgNOR染色实验
服务介绍:细胞核核仁组织区即参与形成核仁的染色质区,其含有酸性非组蛋白类蛋白质,对银有较高的亲和力。也称嗜银蛋白。这些AgNOR参与核糖体基因RNA的转录,与核糖体的形成和蛋白质的合成密切相关。其数量和形状反应细胞的增殖活性,可用以鉴别正常细胞和肿瘤细胞。
染色原理:
核仁组成区(NORs)是染色体上的一个编码核糖体RNA(rRNA)的片段,存在于DNA特异性环上,凸向核仁。该区域的嗜银蛋白为一种酸性非组蛋白,具有嗜银性,可以通过胶银染色法显示出来。AgNOR的数量和形态与细胞的增殖活性密切相关,因此可以用于评估细胞的增殖状态。
注意事项:
1、试剂配制:AgNOR染色液的配制需要精确控制明胶和硝酸银的浓度以及溶解条件。
2、染色条件:染色时间、温度和pH值等因素都可能影响染色效果,因此需要在实验中进行优化。
3、结果判读:在观察染色结果时,需要注意区分AgNOR颗粒与背景染色以及其他细胞结构。
送样运输要求:
1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。
2.石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。
仅供科研实验用,不做其他用途!
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文献和实验AgNOR染色实验
实验流程:多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上,随后即可衔接下一轮单标染色,直至全部标记完成,即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合:1)新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2)梯度乙醇浸片,100% 5min;95% 5min;70% 2min。3)灭菌水洗片1min,重复3次。4)10%中性福尔马林浸片10min,灭菌水洗片1min,重复3次。2.微波修复:1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中,用抗原
大家在实验过程中,是不是经常会用到各种染色法?但是染色方法如此之多,其具体方法与步骤又有什么区别?学霸君非常的贴心,帮大家整理了各种染色方法,并作了汇总。以下是从 A 至 V 的染色大法一览表
水质对免疫组化染色结果的影响显著: 在免疫组化染色过程中,实验用水一般用来配制两种试剂: 01 抗原修复液 包括柠檬酸(pH6.0) 、EGTA(pH 9.0) 和EDTA(pH9.0) 等种类,主要用于抗原修复。在免疫组化染色前,必须进行抗原修复,使抗原决定簇充分暴露,以便完全彻底地与抗体结合。未进行抗原修复的抗体即使阳性,其阳性细胞数量及染色强度要明显比进行过抗原修复的少、弱。电导率高的水因杂质存在容易影响溶液pH值,pH值或高或低都会造成抗原修复不佳,抗原决定簇不能完全彻底暴露
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