Tricine-SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(小分子量蛋白

碧云天生产的Tricine-SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(小分子量蛋白用) (Tricine-SDS-PAGE Gel Preparation Kit for Small Molecular Weight Protein)，提供了配制Tricine-SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制不同浓度的Tricine-SDS-PAGE凝胶(即聚丙烯 酰胺凝胶)。本产品优化了配方，无须配制夹层胶，且只需一种电泳缓冲液。Tricine-SDS-PAGE凝胶主要用于小分子量蛋白或多肽(1-40kDa)的分析检测，其电泳缓冲系统采用Tris-Tricine电泳缓冲系统，可以对于小分子量的蛋白获得良好的电泳分离效果，适合用于例如胰岛素、β淀粉样蛋白等小分子量蛋白或多肽的电泳以及后续的Western检测。

聚丙烯 酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)技术广泛用于蛋白质、核酸及蛋白质-核酸复合物的分离纯化、检测、鉴定、分子量分析等实验，是生命科学研究中最基本的实验技术之一。常见的Western印迹(Western blot)检测就是基于PAGE的。Tricine-SDS-PAGE (基于Tris-Tricine缓冲系统)通常用于分离分子量范围为1-100kDa的蛋白质或多肽。它是分辨小于30kDa的蛋白质首 选的电泳系统，对于从生物膜中分离膜蛋白复合物也很有帮助[1]。在传统的Glycine-SDS-PAGE (也被称为Laemmli-SDS-PAGE，基于Tris-Glycine缓冲系统)中，随着电泳的进行，浓缩胶中来自样品和电泳液中SDS的游离的十二烷基硫酸根(Dodecyl sulfate, DS)离子持续累积，并与小分子量蛋白的结合，阻碍了小分子量蛋白的分离，从而导致条带模糊和分辨率降低，干扰小分子量蛋白的固定和染色。在Tricine-SDS-PAGE中，凝胶缓冲液的pH值较低，并在电泳缓冲液中用Tricine替代Glycine，可以有效降低SDS与小分子量蛋白的结合，使小分子量蛋白或多肽能更好地分离，呈现了更清晰的条带和更高的分辨率。同时，Tricine的pKa值为8.15，Glycine的pKa值为9.6，由于pKa的变化，两种方法对高或低分子量蛋白质的分辨率也各不相同。Glycine-SDS-PAGE的凝胶可以分离高分子量蛋白质(20-200kDa)，但即使是使用较高的丙烯 酰胺(Acrylamide)浓度的凝胶(4-20%梯度凝胶)，小于20kDa的蛋白质也会因为扩散等原因较难清楚地分离。Tricine-SDS-PAGE只能用于分离低于100kDa的蛋白质，尤其是20kDa或更低分子量的蛋白质或多肽可以通过这种方法很好地分离[2]。此外，Tricine-SDS-PAGE有助于在蛋白质印迹过程中轻松转移疏水性蛋白质，适用于从二维凝胶中分离疏水性蛋白质以进行质谱分析[3]。

本试剂盒提供的Gel Buffer使用略偏碱性pH的Tris缓冲液制备，具有较低的pH值，尽可能地减少了蛋白质修饰的干扰，适用于变性蛋白电泳。电泳时使用Tris-Tricine缓冲系统的SDS-PAGE电泳液，推荐使用Tricine-SDS-PAGE Running Buffer (10X) (P0739)。电泳后可以使用Tris-Glycine缓冲系统的转膜液进行转膜，推荐使用Western转膜液(P0021A或P0021B)。

本试剂盒约可配制30-50块常规大小的Tricine-SDS-PAGE凝胶。具体可以配制的凝胶数量和凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。

包装清单：

保存条件：

4ºC保存，一年有效。Gel Buffer和凝胶聚合催化剂可以室温保存。30% Acr-Bis (29:1)和TEMED Substitute 4ºC避光保存。凝胶聚合催化剂用蒸馏水配制成10%溶液后，分装成小管-20ºC保存，通常半年内有效。

注意事项：

凝胶聚合催化剂用水配制成10%溶液后，应当分装成小管-20ºC保存。同时应尽量减少室温存放时间，以防失效。

TEMED Substitute易挥发，使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节凝胶聚合催化剂和TEMED Substitute的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。

TEMED Substitute易燃，有腐蚀性，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其他物品。

如果需要30% Acr-Bis (29:1) (ST003)可向碧云天单独订购。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。