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SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X, 含除粘增溶剂)

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  • P0015G
  • 2025年09月17日
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      10ml

    SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X, 含除粘增溶剂),即SDS-PAGE Sample Loading Buffer (1X, with Solubility Enhancer),是一种在SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) (P0015A)的基础上额外提供了除粘增溶剂的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液,与普通SDS-PAGE蛋白上样缓冲液相比是一种通常能更完全裂解细胞或组织样品从而制备出裂解效果更好的蛋白样品的经过改良的蛋白上样缓冲液[1],也能用于细胞或组织样品的裂解和蛋白提取。

    本产品的性能和用途与碧云天生产的普通型SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) (P0015A)基本相同,但本产品配套提供了特殊的除粘增溶剂,可以有效消除普通型SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)在提取细胞和组织样品时可能出现的絮状或粘稠状物,使裂解后的样品更易于吸取、操作更加精准便利,同时也可以显著提高了细胞或组织样品的蛋白提取效果。

    通常情况下将本产品加入样品后作用约1-2分钟粘稠状物即会消失,可以显著改善普通型SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) (P0015A)在提取蛋白时出现的粘稠问题,并且能够提高蛋白的提取率。

    本产品提供的除粘增溶剂使用方便,作用迅速,并且在SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) (P0015A)中相对比较稳定。将本产品中的除粘增溶剂(500X)按照比例加入SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X),匀混后即可直接使用,其除粘增溶作用显效非常快,加入样品后仅需作用约1-2分钟絮状或粘稠状物就会消失。本产品中的除粘增溶剂加入SDS-PAGE蛋白上样缓冲液后在短时间内也相对比较稳定,4℃存放在1小时内活力不受影响,25℃存放在5分钟内也可以保持活力,通常建议现配现用。除粘增溶剂含有多种组分,包括不含标签的来自非常见微生物的酶,不会消化样品中的蛋白,通常也不会干扰常规的Western或免疫沉淀实验。

    本裂解液可以直接用于细胞或组织样品的裂解,并用于后续常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。使用SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷;缺点是裂解好的蛋白样品不能用常规的Bradford法或BCA法测定蛋白浓度。这样蛋白上样量的均一性就较难控制,需要借助考马斯亮蓝等的染色结果或Western的检测结果,来调整上样量。当细胞量或组织用量能控制得比较均一时,使用本裂解液直接裂解获取蛋白样品会比较便捷。

    本产品也可以用于SDS-PAGE时待上样蛋白样品的稀释等。

    包装清单:

    产品编号产品名称包装
    P0015G-1SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)10ml
    P0015G-2除粘增溶剂(500X)20µl
    说明书1份

    保存条件:

    -20ºC保存,至少一年有效。

    注意事项:

    SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。

    SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)必须完全融解后再使用。

    由于SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X)中含有的SDS对本产品中的除粘增溶剂的活性有一定的影响,建议SDS-PAGE蛋白上样缓冲工作液现配现用,且配制好的含有除粘增溶剂的上样缓冲工作液应4ºC或冰上低温存放,在1小时活力不受影响,如果在25ºC的室温存放,建议在5分钟内使用为宜,存放更长的时间其除粘增溶的效果会受到一定程度的影响。

    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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    图标文献和实验
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    • 免疫共沉淀实验指南

      或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心(3000 rpm,5 min)收集 Agarose 珠子,弃掉上清,用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。(小心吸取上清,避免触碰底部珠子) 收集沉淀,加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀,轻混均匀后煮沸 5 min,12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管,进行 Western 检测。

    • Western Blot(免疫印迹法)步骤

      相关专题 主要包括以下 4 个基本步骤:样品制备;电泳分离;蛋白的膜转移;免疫 杂交与显色――蛋白检测。 溶液和试剂 1. 1X 磷酸盐缓冲液(PBS ) 2. ModifiedRIPAbuffer:Tris-HCl:50 mM, pH 7.4; NP-40: 1%;Na-deoxycholate: 0.25%;NaCl: 150 mM;EDTA :1 mM;PMSF: 1 mM

    • Western blot 实验步骤及其注意事项

      蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS-PAGE蛋 白上样缓冲液可以减小上样体积,在相同体积的上样孔内可以上样更多的蛋白样品。5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以参考相关文献资料配制,也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)。 100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。

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