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Cytiva
- Immobiline DryStrip 凝胶可用于 Multiphor II 电泳系统。
此试剂盒设计用于使用预制的 Immobiline 干胶条,运行于 2-D 实验的第一向电泳,参见 Immobiline DryStrip Gels。每个条带上样量高至 100 μl 的样本,可同时运行 12 条胶条
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文献和实验胶条槽中,慢慢下压胶条,并前后移动,避免生成气泡,最后放下IPG 胶条平端(阴极),使水化液浸湿整个胶条,并确保胶条的两端与槽的两端的电极接触。 4.IPG 胶条上覆盖适量 Immobiline DryStrip 覆盖油,盖上盖子。 5.将标准型胶条槽的尖端背面电极与IPGphor 仪器的阳极平台接触;胶条槽的平端背面电极与 IPGphor 仪器的阴极平台接触。 6.设置IPGphor 仪器运行参数:IPG 胶条水化的电压,温度和时间;等电聚焦电泳时的梯度电压和温度。电泳参数见下表
梯度、分离结果重现性好。 3. 在双向电泳应用中所面临的问题 许多疏水性蛋白质 ( 如膜蛋白 ) 不溶于样品缓冲液,分子 量过大 (>200kD ( 千道尔顿 )) 极端酸性或碱性蛋白在电泳过程中易丢失, 2DE 不能分辨。低含量组分易被高含量组分遮蔽,降低分辨率。蛋白在提取和消化过程中的丢失、凝胶的污染、在不影响分辨率情况下的上样量等等。 双向电泳实验步骤和溶液配置 A. 实验过程 一、 实验原理:2-DE的第一向电泳等电
好。 3. 在双向电泳应用中所面临的问题 许多疏水性蛋白质 ( 如膜蛋白 ) 不溶于样品缓冲液,分子量过大 (>200kD ( 千道尔顿 )) 极端酸性或碱性蛋白在电泳过程中易丢失, 2DE 不能分辨。低含量组分易被高含量组分遮蔽,降低分辨率。蛋白在提取和消化过程中的丢失、凝胶的污染、在不影响分辨率情况下的上样量等等。 双向电泳实验步骤和溶液配置 A. 实验过程 一、 实验原理:2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离,第二
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