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文献和实验PCR Protocol(per Adam 08/12/04) 【University of Chicago】
The Preuss Lab,The Division of Biological Sciences,The University of Chicago PCR.html">http://preuss.bsd.uchicago.edu/protocols/PCR.html 上一篇:TAIL PCR Protocol 下一篇:RT-PCR Protocol
酵母菌落 PCR 方法 1. 在冰上配制反应混合液: 2 μ l 10 ×菌落 PCR 缓冲液 1.2 μ l 25mmol/L MgCl2 0.4 μ l 10mmol/L dNTPs 10pmol 引物(每一种引物) 0.2 μ l
, Fast程序,以cDNA为模板进行。C. 目的基因的设置:有几个目的基因和目的基因的名称。D. 样品的设置:包括哪个是实验组,哪个是对照组。以及负对照的设置和生物重复的设置。E. 对照组和内参基因的设置:这个是为后面的定量做准备F. 反应程序的设置:PCR反应程序的设置要根据不同公司的MasterMix。比如BioTeke的95℃ 2分钟就可以激活DNA聚合酶(ABI的需要10 分钟)。循环反应是95℃15秒,60℃15秒的40个循环。溶解曲线程序采用仪器默认设置就可以。或者是仪器说明书上建议的程序
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