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质粒与引物设计篇

效率，比如电转化比化学转化的效率更高。   3. 如何设计目的片段引物？ PCR 引物设计，是决定实验是否成功的重要一环，现有的 PCR 设计工具，比如‌Primer-BLAST (NCBI)、Primer Designer Tool (Thermo Fisher)、 Primer3 等都可以针对目标序列设计出相应的引物，可以根据目标序列特征、实验室资源来选择合适的引物设计工具。如果后续通过无缝克隆的方法构建载体，在设计 PCR 引物时，还需要将同源臂序列添加到上下游引物的两端。具体添加方法可参考所用的同源

蛋白质翻译后修饰（PTMs)概述

蛋白质翻译后修饰 (Protein translational modifications，PTMs) 通过功能基团或蛋白质的共价添加、调节亚基的蛋白水解切割或整个蛋白质的降解来增加蛋白质组的功能多样性。这些修饰包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚硝基化、甲基化、乙酰化、脂质化和蛋白水解，几乎影响正常细胞生物学和发病机制的所有方面。因此，识别和理解 PTM 在细胞生物学和疾病治疗和预防的研究中至关重要。 看到一篇 Thermo Fisher的文章，关于翻译后修饰Post

转染后效率低、细胞长不好？90% 的坑都藏在这些操作细节里

，比机械增加质粒或转染试剂更有效。   参考资料 1. Thermo Fisher Scientific. Lipofectamine™ 3000 Reagent Protocol. 2. Thermo Fisher Scientific. Lipofectamine™ 2000 Transfection Protocol. 3. Thermo Fisher Scientific. Lipofectamine™ RNAiMAX Transfection Guidance. 4. Promega.