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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 英文名:
pTac-MCS-TEV-GST
- 保质期:
3个月~12个月
- 供应商:
上海禾午生物有限公司
- 保存条件:
负20℃&负80℃
- 规格:
干粉&甘油菌
| 名称 | pTac-MCS-TEV-GST |
| 别称 | - |
| 质粒宿主 | 大肠杆菌 |
| 质粒用途 | 蛋白表达 |
| 片段类型 | ORF |
| 原核抗性 | Amp |
| 启动子 | Tac |
| 复制子 | pUC |
| 拷贝数 | 低 |
| 感受态 | DH5a |
| 温度 | 37度 |




| pKD46-Tac-EGFP |
| pUC57-Tac-ECFP-EGFP |
| pBAD30-Kan |
| pKD4-Hyg |
| pGTVL2-XIAP(human)(124-242aa) |
| pT7-RNF5(human-opt-ecoli)-6×His |
| pET-32M |
| pBAD18-EGFP |
| pTYB21 |
| pSEVA321 |
| pT7-6×His-RNF5(human-opt-ecoli)-6×His |
| pT7-6×His-PLIN5(human-opt-ecoli) |
| pT7-6×His-3×FLAG-SV40NLS-espcas9(1.1)-EGFP-6×His |
| pT7-6×His-3×FLAG-SV40NLS-espcas9(1.1)-NLS-6×His |
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文献和实验用蛋白或多肽标签融合于重组蛋白中,进而方便重组蛋白的纯化和检验。小分子标签通常免疫原性较低,且不影响目标蛋白功能而得以保留。但是大分子标签如 GST 因其对目标蛋白的结构和生物活性有所影响,通常需要去除。 今天我们就来聊一聊柱上酶切那点事儿~ 什么是柱上酶切 柱上酶切纯化路线是指在吸附了标签蛋白的层析柱上添加蛋白酶进行在位去除标签,具有更加灵活、高效、快速的特点。 相比于常规的洗脱后的酶切纯化路线,柱上酶切不仅可以简化酶切后的再次上样操作,同时可以尽量避免操作过程中目标
步骤的。pGEX-6P有三种载体,以方便你从不同的酶切位点插入都不会造成移码突变。另外值得一提的是pGEX-2TK是专门为了体外标记融合产物以检测表达情况而设计的。它含有来自心肌的cAMP依赖性蛋白激酶催化亚单位的识别位点,这个位点位于GST和多克隆位点之间。表达的蛋白可以直接用蛋白激酶和[g-32P]ATP进行标记,产物可以用放射自显影技术稳定地检测。它的GST可以用凝血酶切除。总的说来,pGEX所有载体都提供了三种不同的翻译读码框选择;都是利用乳糖操纵子调控模式,启动子都是Ptac。Ptac是由trp启动
蛋白有更好的可溶性。另外,使用NusA系统验证,八个较大分子量蛋白(>70kDa)中的七个得到了可溶性表达,而其它的融合标签(GST,MBP和hexahistidine)系统则只得到了四个可溶性表达的蛋白。 表1. 用大量的目标蛋白评估NusA标签对提高融合蛋白可溶性的作用 参考文献a 目的蛋白数目
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