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文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
乳酸脱氢酶硝基蓝四唑盐法乳酸脱氢酶(1actate dehydrogenase,LDH)是辅酶I(NAD)依赖性脱氢酶,能氧化乳酸为丙酮酸,为无氧糖酵解途径的标志酶。硝基蓝四唑盐法显示LDH活性的原理与显示SDH活性的原理基本相同,只是需加用NAD,氢从反应生成的还原型辅酶I(NADH)传递给四唑盐,将其还原为甲脂。 1)孵育液配液0.06mol/LPBS 0.25ml1.0mol/LD,L乳酸钠 0.1ml0.4%NAD 0.1ml0.
①培养基; ②药敏纸片; ③菌量; ④操作方法医学`教育网搜集整理; ⑤培养条件、温度和时间; ⑥抑菌圈测量工具的精度及测量方法; ⑦质控标准菌株本身的药敏特性是否合格,有无变异。
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