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48T, <i>96T</i>, 96T×5, 96T×10, 96T×100
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文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
;Aprotinin,leupeptin,pepstatin:1 microgram/ml each;Na3VO4: 1 mM;NaF: 1 mM 3. 1X SDS 样品缓冲液:62.5 mMTris-HCl(pH 6.8 于 25° C), 2% w/v SDS, 10%甘油,50 mMDTT, 0.01% w/v溴酚蓝 4. 转移缓冲液:25 mM Trisbase, 0.2 M 甘氨酸, 20%甲醇 (pH 8.3) 5. 10X Tris缓冲盐 (TBS):准备1L
实验试剂 1. 免疫吸附剂系结合有IgG的纤维素。取纤维素(5%,pH值10.5)与溴化氰一起室温反应10min,用0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液(pH值8.0)充分洗涤。再与IgG一起于4℃下作用18h(20ml缓冲液中含3g纤维素和100mg IgG)。制备物用27mol/L甘氨酸缓冲液(pH值8.0)配成20%(W/V)悬液,贮于4℃。 2. 酶联C1q用戊二醛法将辣根过氧化物酶标记C1q,再经超滤AmiconXM200滤膜
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