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文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
免疫球蛋白的轻链可分为Kappa型和Lambda型。每一轻链上的型别只能属于两型别中的某一型别,而不能两者兼而有之,亦即属于Kappa型或是Lambda型,而不能有Kappa-Lambda型者。Kappa型和Lambda型的不 同主要表现在氨基酸序列和二硫 链位置的不同。但是,不同种属的 Kappa型或Lambda型之间有较大的相似性, 不同种属的 Kappa /Lambda 的比值并不相同,一般Kappa和Lambda型与重链配对有同样的可能性,只是从某些种属基因表达的研究得知
HLA-I 重链、轻链的制备(包涵体的制备) 此步骤是用原核表达的方法制备HLA-I类分子的重链和轻链,其中重链为HLA-A2分子的α链(胞外段,包括α1至α3功能区),轻链为β2微球蛋白。HLA-A2分子的α链的C端连接有BSP(生物素结合部位),该部位是通过基因重组的方法将BSP序列与HLA-I类分子重链基因连接后,经过原核表达而获得。 【试剂及配制】 (1)LB培养基 (2)0.4M IPTG (3)50mg/ml 溶菌
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