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信励致和
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文献和实验RNA抽提指南(TRIZOL法) 注意事项: * 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌,可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。 * 使用灭菌的,一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA,避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。例如,使用RNA探针的实验室可能用RNA酶A 或T1来降低滤纸上的背景,因而某些非一次性的物品(如自动吸管)可能富含RNA酶。 * 在TRIZOL 中,RNA 是隔离在RNA 酶污染之外的。而对样品
在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase 的作用。 1. 提取组织RNA 时,每50~100mg 组织用1ml Trizol 试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA 时,先离心沉淀细胞,每5-10 �106 个细胞加1ml Trizol 后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞; 2. 将上述组织或细胞
TRIzol RNA 提取 试剂 盒是由 GIBCO BRL 公司推出专供提取 RNA 的产品,其操作方便、快捷。 (一) 试剂 准备 1 . TRIzol 试剂。 2 .氯仿 3 .异丙醇 4 . 75% 乙醇( DEPC H 2 O 配制) 5 . DEPC H 2 O
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