
2×高特异性通用染料法qPCR预混液)
- ¥166.80
- 2026年04月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
500rxns
1. 产品描述:
信励致和®2×高特异性通用染料法qPCR预混液(含示踪剂)是使用 SYBR Green I嵌合荧光法进行qPCR 反应的专用预混液,颜色为淡蓝色,便于加样。核心组分 Taq DNA Polymerase 为一种高性能DNA聚合酶,配以针对qPCR优化的最适反应缓冲液,非常适合于进行高特异性、高灵敏度的qPCR 反应。产品中含有特殊的ROX Reference Dye,适用于所有qPCR仪器,无需在不同仪器上调整ROX的浓度。本产品为浓度 2×的预混液,使用时只需添加引物和模板,使预混液工作浓度为1×即可。
2. 产品特点:
(1)一管预混操作方便;
(2)高灵敏度、高特异性;
(3)适用多种物种来源DNA扩增。
1. 产品组分:
|
组分/含量 |
AB0355 |
|
2×高特异性通用染料法qPCR预混液(含示踪剂) |
5×1 mL |
2. 储运条件:
-25~-15℃避光保存,保质期12个月,干冰运输。
3. 注意事项:
(1)本产品避免反复冻融,以免酶活下降。如每次使量较少,推荐少量分装使用。
(2)使前请上下颠倒以混匀预混液,请勿漩涡以免产过多泡引起反应体系体积失准,影响定量结果。
(3)由于本品中含有荧光染料 SYBR Green I,因此无论是保存预混液还是配制反应体系时都应该尽量避免强光照射。
(4)本品灵敏度极高,即使空中微量的DNA 气溶胶都能引起污染,导致实验失败。配制反应体系时请于超净工作台内进行,配制过程中请使用无菌无酶枪头、反应管,条件容许的实验室推荐使用专用的移液器、带滤芯的枪头,避免交叉污染。
(5)仪器类型不同,熔解曲线采集程序不尽相同,使用仪器默认熔解曲线采集程序即可。
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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
等)、miRNA 加尾法逆转录试剂盒做反转录:适用于短片段 RNA(主要为 miRNA)的加尾法。 4)qPCR 检测 采用 Umibio 2×SYBR Green qPCR 试剂:预混 ROX1 型适用于 ABI 5700 等设备、预混 ROX2 型适用于 ABI 7500 等设备。 5)数据分析:采用仪器自带的 QPCR 分析软件进行数据分析 可以看到 qPCR 检测外泌体可行且可靠,但实验过程并不简单,因此我们对经常会遇到的问题及解答也进行了整理,帮助大家更好的完成实验。 qPCR检测外泌常见问题及解决
成功做完了逆转录,这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多,即使使用了 qPCR 预混液,也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列(Q411 /Q421 /Q431 /Q441)提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时,引物设计需遵循以下原则:引物长度 18~25bp,产物长度 80~300bp,GC 含量 40~60
的动态范围或线性度最佳,可确保基因表达定量的准确性。 所选试剂在扩增过程中应产生较高且一致的 cDNA 得率,以获得具有高灵敏度和低变异性的基因表达结果。可考虑预混液形式的逆转录酶用以可以减少实验误差。 RT-qPCR 的一个特殊程序是从未经 RNA 分离的粗细胞裂解物直接进行逆转录。在使用稀缺样本或选用群体内特定细胞的实验,可考虑使用直接 RT-qPCR 法来防止可能的样本损失和低 RNA 回收。 cDNA 克隆和文库构建 cDNA 文库可由代表特定样本中转录序列的 cDNA 克隆组成
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