- ￥600 - 13200
- Arcegen
- C130005
- 美国
- 2026年03月27日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 供应商：
魔兜儿
- 英文名：
Celthy AAV Transfection Reagent
- 规格：
100μL/1mL/10mL
| 规格： | 100μL | 产品价格： | ￥600.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 1mL | 产品价格： | ￥2200.0 |
| 规格： | 10mL | 产品价格： | ￥13200.0 |
产品简介
本试剂是一种专为悬浮体系规模化生产AAV而开发,产品是经过优化改造后的线性化聚乙烯亚胺（PolyethylenimineLinear,PEI）。本产品纯化学合成，不含动物源成分，细胞毒性低，产品以无菌液体形式提供，具备广泛的AAV血清型适用性。本产品DNA荷载能力强、转染复合物比例低和复合物稳定性高，为大规模AAV生产提供便利。
组分信息
|
组分名称 | C130005S | C130005M |
| Celthy AAV Transfection Reagent |
100 μL |
1 mL |
储存条件
2-8ºC保存，有效期2年。
使用说明
1. 接种细胞
根据细胞生长状态，选择合适的接种密度，建议细胞接种密度为 1-1.5×10 6 cells/mL，使第二天转染时细 胞密度为 2-3×10 6 cells/mL 为宜。
2. 转染复合物配置(以 1 L 体系为例)
1）质粒与转染试剂比例：质粒（μg）：转染试剂（μL）为 1:0.5-1:2。
2）质粒稀释：使用 25 mL 无血清培养基稀释 2 mg 质粒，并轻轻混匀。
3）试剂稀释：使用 25 mL 无血清培养基稀释 2 mL Celthy AAV Transfection Reagent 转染试剂，并轻轻 混匀。
4）配置复合物：将配置好的 25 mL 质粒稀释液加入到 25 mL 转染试剂稀释液中，轻轻涡旋混匀后，室温 静置 20 min，形成质粒-PEI 复合物，备用。
表 1 转染复合物参数（仅供参考）
|
参数类型 |
推荐条件 |
条件范围 |
|
核酸用量（每百万细胞） |
1 μg |
0.5 μg-2 μg |
|
核酸与转染试剂比例（μg:μL） |
1:1 |
1:0.5-1:2 |
|
转染复合物体积（%培养体积） |
5% |
1%-10% |
|
复合物孵育时间 |
20 mins |
15 mins-60 mins |
|
复合物介质（无血清等添加物） |
无血清培养基 |
无血清培养基，PBS |
3. 转染细胞
1）直接将 50 mL 的质粒-PEI 复合物均匀小心加入细胞中。
2）在 37℃与 5% CO2 条件下继续培养细胞，并在培养 72 h 后收获病毒。
注意事项
1. 为提高转染效率，建议悬浮细胞在无血清培养体系中驯化几天后进行转染操作。
2. 转染过程中推荐使用高质量的质粒，如无内毒素、无蛋白和RNA残留的质粒。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。
表 1 转染复合物参数（仅供参考）
|
细胞培养参数 |
转染参数 | ||||
|
细胞密度 |
培养体积 |
总细胞数量 |
复合物体积 |
DNA 用量 |
转染试剂体积 |
|
2×10 6 cells/mL |
30 mL |
6×10 7 cells |
1.5 mL |
60 μg |
60 μL |
|
1 L |
2×10 9 cells |
50 mL |
2 mg |
2 mL | |
|
100 L |
2×10 11 cells |
5 L |
200 mg |
200 mL | |
|
2.5×10 6 cells/mL |
30 mL |
7.5×10 7 cells |
1.5 mL |
75 μg |
75 μL |
|
1 L |
2.5×10 9 cells |
50 mL |
2.5 mg |
2.5 mL | |
|
100 L |
2.5×10 11 cells |
5 L |
250 mg |
250 mL | |
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光颗粒，造成假阳性判断。 3.正确调节显微镜焦距 缺乏显微镜操作经验的研究者容易因调焦不当而看不到细胞内荧光点，误判为转染阴性。应耐心调节焦距，寻找细胞质内清晰的点状荧光。 转染阳性率的判断意义与误区 1.转染阳性率仅为初步参考指标 转染阳性率仅反映siRNA是否被转入细胞，不能代表siRNA能否被有效释放并发挥基因沉默作用。判断siRNA转染效果的金标准是目标基因mRNA的敲降水平（如qPCR检测），而非荧光阳性率。 2.荧光强度≠转染效率 一些转染试剂（如阳离子脂质体、PEI类）转染后细胞内荧光很强
融合，也有自身环形形式存在的。与基因组融合后的质粒可以在细胞分裂的时候带给子细胞，所以可以用来筛选稳定细胞株。而有的质粒则在传代过程中丢失。每个转染细胞内的质粒数量就很难说了，看转染效率吧。从概率来说，当然是数量越多，蛋白表达会高一点，当然也不是绝对的。最常用的转染试剂包括磷酸钙、PEI、lipofectamine等等，还有各个生物公司有自己的试剂，质量应该也都不错。 bioenw 质粒转染的效率不如病毒转染的效率高，像慢病毒，可以稳定整合到基因组，子代也不会丢失
