LipoRNAi™转染试剂

产品简介

LipoRNAi™转染试剂(LipoRNAi™ Transfection Reagent)是研发的一种以纳米材料为基础的非常便捷高效的小RNA(包括siRNA、miRNA等)细胞转染试剂，达到甚至超过了国际主流小RNA转染试剂的转染效果。适用于把siRNA、miRNA或其它形式的单链或双链RNA或DNA小核酸转染到真核细胞中，也可以用于活体动物的siRNA、miRNA等小核酸转染以及用于基因治疗等。
LipoRNAi™转染试剂的纳米技术可保证其瞬时转染和稳定转染时的可靠性和稳定性。
LipoRNAi™转染试剂使用特别便捷，无血清培养液和小RNA及转染试剂可以直接混匀，室温孵育20分钟，即可直接加入到细胞培养器皿内，实现了细胞转染的便捷操作。
LipoRNAi™转染试剂对于常见的哺乳动物细胞具有非常高的转染效率、重复性好、操作简单、细胞毒性极低，对于贴壁细胞和悬浮细胞都适用，特别适用于难转染的贴壁细胞。LipoRNAi™转染试剂通常没有明显细胞毒性，从而在转染后大多数情况下无需进行细胞培养液的更换，很多情况下在转染约48小时后可以收集细胞进行靶向的目的蛋白的表达检测。对于有些半衰期比较长的目的蛋白需要在转染siRNA或miRNA后72-96小时，才能检测到蛋白水平的显著下降。
LipoRNAi™转染试剂经过对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3、人胚胎肾细胞HEK293、宫颈癌细胞Hela、中国仓鼠卵巢细胞CHO等多种细胞的测试，转染效率可以达到80-90%左右。贴壁细胞转染试剂的比较和选择请参考：http://www.beyotime.com/support/lipo.htm。
LipoRNAi™转染试剂转染细胞时，不受培养液中血清和抗生素的影响，即可以在血清和抗生素存在的情况下进行细胞转染。
LipoRNAi™转染试剂的转染效果可以通过转染荧光标记的小RNA在荧光显微镜下进行快速鉴定，也可以结合Western检测结果进行判定。LipoRNAi™转染试剂转染FITC标记的靶向STIM1的siRNA转染效果参考图1和图2。

图1. LipoRNAi™转染试剂转染FITC标记的STIM1-siRNA至Hela细胞(A-C)或NIH3T3细胞(D-F)后4h的实拍图片。FITC标记的STIM1-siRNA均黏附于细胞膜上或已通过内吞(endocytosis)的方式进入细胞。 A、B和C分别为Hela细胞的明场图片、荧光图片和两者的叠加图片。D、E和F分别为NIH3T3细胞的明场图片、荧光图片和两者的叠加图片。NIH3T3细胞和Hela细胞均接种于六孔板，转染时每孔加入100pmol FITC标记STIM1-siRNA和4μl LipoRNAi™转染试剂的混合物。

图2. LipoRNAi™转染试剂转染FITC标记的STIM1-siRNA至Hela或NIH3T3细胞48h后，通过Western blot检测STIM1蛋白的下调效果。Western blot所使用的STIM1抗体(AF2614 Stromal interaction molecule 1 Rabbit Monoclonal Antibody)按照说明书1:1000稀释，二抗辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L) (A0208) 1:1000稀释。GAPDH为内参。A为Western blot的检测结果；B为A图及重复实验的灰度定量统计图。

每毫升本转染试剂大约可以转染10厘米培养皿40个、6厘米培养皿125个、6孔板250个孔、12孔板625个孔、24孔板1250个孔、48孔板2500个孔、96孔板6250个孔。
保存条件：
4℃保存。长期不使用可以-20℃保存。
注意事项：
增加LipoRNAi™转染试剂用量容易导致转染效率下降，请优先按照推荐的转染试剂用量进行转染。如有必要再调整用量。
使用高纯度的小RNA等小核酸有助于获得较高的转染效率。
转染前细胞必须处于良好的生长状态。
经测试在使用本产品转染后4-6小时更换细胞培养液，并不会对转染效率产生显著影响。如有必要，完全可以在转染后4-6小时更换细胞培养液。
需自备不含抗生素的无血清培养液、Opti-MEM^®培养液或普通的DMEM培养液。
LipoRNAi™转染试剂不能vortex或离心，宜缓慢晃动混匀。
LipoRNAi™转染试剂使用后请立即盖好盖子，避免长时间暴露在空气中，影响转染效率。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！