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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 供应商:
魔兜儿
- 英文名:
Celthy Polyethylenimine Linear (PEI)
- 规格:
100μL/1.5mL/10mL/100mL
| 规格: | 100μL | 产品价格: | ¥150.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1.5mL | 产品价格: | ¥800.0 |
| 规格: | 10mL | 产品价格: | ¥4200.0 |
| 规格: | 100mL | 产品价格: | ¥39000.0 |
产品简介
Celthy PEI转染试剂转染试剂是一种化学合成、不含动物源成分、经优化改造后的线性化聚乙烯亚胺(Polyethylenimine Linear, PEI),浓度为1 mg/mL。
产品特点
适合转染DNA,细胞密度在70%~80%时,转染效率可以达到80%以上;
既适合贴壁细胞,也适合悬浮细胞转染;
可满足瞬时转染和稳定转染;
转染细胞形态良好并表达大量的目的蛋白;
产品易溶、操作简便;
适用于大规模的转染。
运输与保存方法
运输方式:冰袋运输。保存方式:2-8ºC保存,有效期2年。
注意事项
1)为提高转染效率,建议悬浮细胞在无血清培养体系中驯化几天后进行转染操作。
2)转染过程中推荐使用高质量的质粒,如不含内毒素的质粒。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。
4)本产品仅用于科研用途。
转染操作流程
一 悬浮细胞(以1 L体系为例)
1 接种细胞
根据细胞状态,选择合适的接种密度,建议细胞接种密度为1-1.5×106 cells/mL,使第二天转染时细胞密度为2-3×106 cells/mL为宜。
2 转染复合物配置
1)质粒与试剂比例:建议质粒(μg)与试剂(μL)参考配比区间为1:1 - 1:3。
2)质粒稀释:使用50 mL无血清培养基(Opti-MEM)稀释2 mg质粒,并轻轻混匀。
3)试剂稀释:使用48 mL无血清培养基(Opti-MEM)稀释2 mL Celthy Polyethylenimine Linear (PEI)转染试剂,并轻轻混匀。
4)配置复合物:将配置好的50 mL试剂稀释液加入到50 mL质粒稀释液中,轻轻涡旋混匀后,室温静置10-20 min,形成质粒-PEI复合物,备用。
3 转染细胞
1)直接将100 mL的质粒-PEI复合物加入1 L培养的细胞中。
2)在合适温度与CO2等条件下继续培养细胞,并在培养72 h-96 h或摸索的合适条件下进行病毒收获。
二 贴壁细胞(以10 cm培养皿为例)
1 接种细胞
根据细胞状态,选择合适的接种密度,建议细胞铺板密度为50-80 %,使第二天转染时细胞密度70-90 %为宜。
2 转染复合物配置
1)质粒与试剂比例:建议质粒(μg)与试剂(μL)参考配比区间为1:1至1:3。
2)质粒稀释:使用250 μL无血清培养基(Opti-MEM)稀释8 μg质粒,并轻轻混匀。
3)试剂稀释:使用242 μL无血清培养基(Opti-MEM)稀释8 μL Celthy Polyethylenimine Linear (PEI)转染试剂,并轻轻混匀。
4)配置复合物:将配置好的250 μL试剂稀释液加入到250 μL质粒稀释液中,轻轻涡旋混匀后,室温静置10-20 min,形成质粒-PEI复合物,备用。
3 转染细胞
1)直接将500 μL的质粒-PEI复合物加入10 mL培养的细胞中。
2)在合适温度与CO2等条件下继续培养细胞,并在培养72 h-96 h或摸索的合适条件下进行病毒收获。
表1 不同细胞培养容器转染用量(仅供参考)
|
培养容器 |
表面积(cm2) |
DNA稀释 |
转染试剂稀释 |
培养基 总量 | ||
|
DNA量(μg) |
稀释液体积(μL) |
转染试剂量(μL) |
稀释液体积(μL) | |||
|
96孔板 |
0.3 |
0.1 |
5 |
0.1 |
5 |
100 μL |
|
48孔板 |
0.7 |
0.2 |
10 |
0.2 |
10 |
200 μL |
|
24孔板 |
1.9 |
0.5 |
25 |
0.5 |
25 |
500 μL |
|
12孔板 |
3.8 |
1 |
25 |
1 |
25 |
1 mL |
|
6孔板 |
10 |
2 |
50 |
2 |
50 |
2 mL |
|
25 cm2培养瓶 |
21 |
4 |
100 |
4 |
100 |
4 mL |
|
75 cm2培养瓶 |
58 |
8 |
250 |
8 |
250 |
10 mL |
|
10 cm培养皿 |
60 |
8 |
250 |
8 |
250 |
10 mL |
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文献和实验材料: 质粒DNA 指数生长的真核细胞 PEI (聚乙烯亚胺) 1×HBS (pH7.4) 配方: PEI 储存液(100 μM):称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS (pH7.4)中, 0.2 μm 滤膜过滤,储存于4℃备用。 1×HBS (pH7.4): 将8.76 g NaCl 溶解于900 ml 超纯水,加入20 ml 1 M 的HEPES,调pH 值到7.4,定容至1 L,过滤(0.2 μm 滤膜)后储存于4℃备用。 方法
liufengxi 我用PEI(sigma 25kDa)作为转染试剂,但是发现,同样的细胞,同样的N/P 条件下。转染效果一次比一次要差,难道是PEI容易在水性条件下降解? 我们的这个PEI买的时间比较久了,不知道是不是该买新的了。 一直找不出原因,很是郁闷,请大虾帮忙解答, dafang0212 PEI粉末放置久了后,是会出现转染效率变差的状况的。另外不知道你的PEI用做转染前有进行加热
病毒载体在生物医学的基础研究和产品开发中具有重要作用,细胞转染是制备病毒载体的关键步骤。然而现有转染试剂价格昂贵、操作繁琐,已成为快速、高效和大规模制备病毒载体的限制因素。QuickShuttle系列转染试剂是由北京康碧泉生物科技有限公司研发的一类具有自主知识产权、独特配方的阳离子型转染试剂,具有高效、低毒和易于使用等优点。QuickShuttle区别于常规转染试剂的两个最主要特点是:(1)可以在细胞传代后尚未贴壁时立即进行转染(立传立转);(2)转染操作可在一分钟内完成











