胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)等多

做了这么多的 WB，你知道化学发光和荧光可以一起检测吗？

，1小时）预处理。预处理后，在每个样品（12.8nM，15min）中加入胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）。细胞裂解，用 WB 测定 p-AKT（Ser473）的相对含量，用 No-Stain 蛋白标记试剂进行总蛋白归一化检测。 参考文献：Yi Liu,. Hydrogen Sulfide Maintains Mesenchymal Stem Cell Function and Bone Homeostasis via Regulation of Ca2+ Channel Sulfhydration

如何培养脐静脉内皮细胞（HUVEC）?

uptake positive● Smooth muscle alpha-actin negative推荐的培养基及试剂 ● 内皮细胞生长培养基（2）内皮细胞生长培养基和内皮细胞生长培养基 2 是低血清（2% V/V）培养基，适用于培养大血管内皮细胞。内皮细胞生长培养基 2 缺少内皮细胞生长辅剂（ECGS、牛下丘脑提取物），但含有胰岛素样生长因子（Long R3 IGF）和血管内皮生长因子（VEGF）。一般而言，在培养过程中，VEGF可以使内皮细胞更快速地增殖。最后，由于其对细胞代谢有多方面的影响

【求助】如何提取细胞中的cAMP？和普通蛋白的裂解buffer一样么？

磷酸二酯酶抑制剂。 贴壁细胞可以用一般的蛋白裂解Buffer，有时要加磷酸二酯酶抑制剂。 关于是否需要乙酰化的问题，不同的试剂盒有不同的要求，主要取决于抗体是否灵敏，也取决于最后检测的方法。一般乙酰化之后可以提高10倍的检测灵敏度。如果抗体灵敏，可以免去乙酰化的那一步，太容易引入误差。 另外，如果用荧光法、发光法检测碱性磷酸酶或者辣根过氧化物酶的话，也没必要进行乙酰化，因为荧光法、发光法检测比显色法检测灵敏度高。 另外，Promega公司有基于培养细胞的cAMP检测试剂盒