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- 文献和实验
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999
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96T
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文献和实验信号大概是绿色探测器的15%。因此,如果我们从橙色探测器中减秒绿色探测器信号的15%,那无论有多少FITC信号存在,经校准后的橙色荧光探测器信号将总为零。这时可在系统中加入PE荧光,橙色荧光探测器经扣除了15%的绿色信号后将显示真正的PE荧光信号,而不用再考虑是否存在FTIC荧光了。这就是“一步法”荧光补偿:在第二探测器中修正来自另一荧光的信号。 二步法(双)荧光补偿通过检测只染有PE荧光的细胞来获知此比例,一般它的数值是2%左右。这称之为PE荧光补偿校正物。但如果PE荧光出
示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
【求助】如何提取细胞中的cAMP?和普通蛋白的裂解buffer一样么?
磷酸二酯酶抑制剂。 贴壁细胞可以用一般的蛋白裂解Buffer,有时要加磷酸二酯酶抑制剂。 关于是否需要乙酰化的问题,不同的试剂盒有不同的要求,主要取决于抗体是否灵敏,也取决于最后检测的方法。一般乙酰化之后可以提高10倍的检测灵敏度。如果抗体灵敏,可以免去乙酰化的那一步,太容易引入误差。 另外,如果用荧光法、发光法检测碱性磷酸酶或者辣根过氧化物酶的话,也没必要进行乙酰化,因为荧光法、发光法检测比显色法检测灵敏度高。 另外,Promega公司有基于培养细胞的cAMP检测试剂盒
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