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文献和实验)骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞能产生并分泌大量的免疫球蛋白 ,这样的瘤细胞融合后,可能影响或降低所分泌抗体的滴度,所以必须选育出非分泌免疫球蛋白 缺陷型的骨髓瘤细胞。 选择骨髓瘤细胞的条件:①该瘤细胞系的来源应与制备脾细胞小鼠为同一品系,以便两者的组织相容性抗原 一致;②骨髓瘤细胞必须是静息状态,不产生γ球蛋白或不分泌到细胞外;③骨髓瘤细胞生长需要一个较高的细胞密度,最好106个细胞/ml;④生长速度快,繁殖时间短。 目前常用的Balb/c小鼠产生
组织下沉,把细胞悬液移入离心管中。 (6) 以2.5%FCS―1640充满离心管,并以400g离心7min~10min(与此同时应开始制备骨髓细胞)。 (7) 把沉淀用约10ml的新鲜培养液再悬浮。 (8) 重复⑹、⑺步骤。 (9) 计算细胞,以台盼兰染色用相差显微镜检查,活细胞数应高于80%为合格。 骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞能产生并分泌大量的免疫球蛋白,这样的瘤细胞融合后,可能影响或降低所分泌抗体的滴度,所以必须选育出非分泌免疫球蛋白缺陷型的骨髓瘤细胞。 选择骨髓
移入小试管中。 (5)直立小试管3min,使大块的结缔组织下沉,把细胞悬液移入离心管中。 (6)以2.5%FCS—1640充满离心管,并以400g离心7min~10min(与此同时应开始制备骨髓细胞)。 (7)把沉淀用约10ml的新鲜培养液再悬浮。 (8)重复⑹、⑺步骤。 (9)计算细胞,以台盼兰染色用相差显微镜检查,活细胞数应高于80%为合格。 (二)骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞能产生并分泌大量的免疫球蛋白,这样的瘤细胞融合后,可能影响或降低
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