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文献和实验大鼠丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)酶联免疫分析
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入丝裂原激活的蛋白激酶 /MAP 激酶 (MAPK) ,再与 HRP 标记的丝裂原激活的蛋白激酶 /MAP 激酶 (MAPK) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的丝裂原激活的蛋白激酶 /MAP 激酶 (MAPK) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠丝裂原
酸-3-磷酸激酶在Mg2+ 存在下,利用ATP首先将甘油酸-3-磷酸磷酸化,形成甘油酸-1,3二磷酸和ADP,然后在甘油醛-3-磷酸脱氢酶催化下,以还原型辅酶I为递氢体,使甘油酸-1,3二磷酸还原并且解磷酸化,形成甘油醛-3-磷酸和无机磷,加入放射性32 P,进一步与ADP结合形成γ-32 P-ADP。 【试剂及材料】 (1)H3 32 PO4 溶液:用1mol/L NaOH将pH调至7.0,备用; (2)反应液:在10ml0.05mol/L,pH8.0 Tris-HC
一、多克隆抗体的概念抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样
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