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文献和实验walterxp 各位前辈,我想请问一下pet32a用什么受体菌做表达比较好,我只有DH5α。谢谢 花生剥了壳 可以用Rosetta或者BL21,表达的都挺好。 walterxp 好的谢谢 我用BL21了 guoda11 BL21,我看行!用pET32a作为表达载体,我们实验室很多真核蛋白都实现了可溶性表达! 本文由丁香园论坛提供,想了解
与正常人的血清反应,从而建立起疾病的特异性诊断方法。3.构建 cDNA 文库一般可用 M13 噬菌体或其他 E.coli 的噬菌体作为 cDNA 文库的展示系统。cDNA 文库的噬菌体展示提供了一个应用免疫学方法进行筛选的条件,取代了细胞内表达 cDNA 文库然后挑选多个菌落的方法。由于 E.coli 只能有效表达一部分真核蛋白,而 M13 噬菌体和其他 E.coli 所能表达的真核蛋白更少。但无论如何,噬菌体表面 cDNA 文库的表达将是研究蛋白质之间相互作用的有用工具。4.构建噬菌体展示抗体
(2)表达载体据受体细胞类型-原核/真核/穿梭,E.coli/哺乳类细胞表达载体。 (3)对原核表达载体应该注意 3 点: ①选择合适的启动子及相应的受体菌; ②用于表达真核蛋白质时注意克服 4 个困难和阅读框错位; ③表达天然蛋白质或融合蛋白作为相应载体的参考。 【3】载体 MCS 中的酶切位点数与组成方向因载体不同而异,适应目的基因与载体易于链接,不产生阅读框架错位。 选用质粒(最常用)做载体的 4 点要求: ①选分子量小的质粒,即小载体(1-
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