肾素结合蛋白(RENBP)重组蛋白

蛋白样品制备中各类杂质和杂蛋白的去除

树脂结构，6% 交联的琼脂糖 ● 「笑三少」-钙调蛋白树脂 钙调蛋白树脂用于亲和纯化钙调蛋白结合蛋白（CBP），包括带有 CBP 标签的重组蛋白和真核生物中钙调蛋白调控的蛋白。树脂是 4% 的琼脂糖偶联到钙调蛋白上，配基的密度是 1 ml 树脂大约是 1 mg 钙调蛋白。 钙调蛋白树脂有单独的树脂产品形式以及试剂盒形式，试剂盒包括： 5 ml 树脂， 100 ml 钙调蛋白结合/漂洗缓冲液， (50 mM Tris-HCl (pH7.5), 200 mM

亲和层析

亲和层析原理 亲和层析是一种通过生物分子之间的特异性相互作用来分离物质的层析方法，如酶和底物、抗原与抗体等非常专一的相互作用 （图9)。配基被固定在填料上，可以结合相应的生物分子，再采用合适的方法如降低pH值、离子强度等，或添加和配基或者目的分子类似的基团，使目标分子以活性的形式被洗脱。 图9 亲和层析原理   特点 速度快，操作简单，可以快速将目标蛋白与大量杂质进行分离 特异性高，经常一步即可达到大于90%的纯度 配基种类繁多，填料选择性高 （包括纯化标签抗体蛋白、抗体、酶类、DNA结合蛋白

一篇搞定 IP、co-IP 实验

的，但是这结果是不是假阳性呢？还得做个阴性对照。阴性对照如何设置呢？考虑到整个实验体系会出现 beads、抗X抗体、诱饵蛋白 X、靶蛋白 Y（co-IP）： 可能出现的假阳性来源 需要的阴性对照 抗 X 抗体结合非特异的蛋白 与 IP 一抗种属亚型相同的免疫球蛋白（比如，抗 X 抗体是 Mouse IgG，阴性对照可使用 Mouse 免疫球蛋白） beads 对蛋白的非特异结合* 同上，此外还可进行 Pre clear，IP 正式实验前排除非特异结合蛋白。如果使用琼脂