成神经细胞瘤抑制瘤变蛋白1(NBL1)重组蛋白

重组蛋白制备工艺优化策略

牢记N端法则：当N端第二个残基是Leu、Arg、Lys、Phe、Tyr和Trp时，重组蛋白半衰期只有2分钟，而小侧链的氨基酸残基，如Ala，则可以提高蛋白稳定性。因此在设计载体时，要特别注意第二个密码子，避免上述残基的出现。处理高毒性蛋白：毒性极高的重组蛋白，其本底表达就会杀死原核宿主，质粒容易丢失，使其在大肠杆菌中很难得到高表达。采用可表达T7溶菌酶的宿主。T7溶菌酶是T7RNA聚合酶的抑制剂，采用含有T7溶菌酶质粒的宿主，如pLysS，可以降低重组蛋白在大肠杆菌快速生长期的本底

大肠杆菌重组蛋白复性

裂解细胞。其中超声波裂解细胞是更广泛应用的一种方法，但利用此方法细胞的裂解率较低，并且液不适用于大量细胞的裂解（超出 50 g）。无论选择何种方法，都必须将细胞置于冰上；   4)        细胞裂解后在混和液中迅速加入蛋白酶抑制剂，每 40 mL 混和液加入 5 mL 的含有 EDTA 的蛋白酶抑制剂 Cocktail Set II 或 1mL 的蛋白酶抑制剂 Cocktail Set III（选做）；   5)        10000

【交流】重组蛋白A在免疫试剂应用中的新进展

性血小板减少性紫瘫和类风湿性关节炎(Prosorba)及带有抑制因子的血友病(linmunosorba)。在国内，蛋白A用于治疗系统性红斑狼疮、重症脂蛋白肾病、肾移植、多发性肌炎、重症肌无力和多发性硬化症。II、重组蛋白A的优势最早获得蛋白A的方法是从金黄色葡萄球菌中直接纯化获得,然而这种方法存在一些问题，例如：天然蛋白A只占菌体总蛋白的1.7%，难以满足大规模生产的需要，且金黄色葡萄球菌为致病菌，大规模生产危险性较大。为避免这些问题，目前人们采用基因工程技术来生产重组蛋白A，实现大规模生产蛋白A。天然蛋白