DNA指导聚合酶γ1(POLg1)重组蛋白

重组蛋白制备工艺优化策略

因为短的肽标签对目标蛋白的结构影响最小，而大的亲和标签可能限制重组蛋白的折叠，影响蛋白质的生物学功能。（2）亲和标签对蛋白质稳定性的影响，亲和标签的加入是否会影响到目标蛋白的正确折叠，是促进目标蛋白的可溶性，还是容易形成包涵体，会不会造成氨基酸C和N端破坏，使目的蛋白表达不完全。（3）亲和标签所融合的位置，亲和标签可以加在N端，可以加在C端，也进行串联。多数情况下蛋白质的N端区域对蛋白质的功能不是太重要，所以在N端进行融合标签的融合常常能保留蛋白质的生物学功能。由于N端DNA序列对蛋白质的转录

Functional Analysis of Mutant Mitochondrial DNA Polymerase Proteins Involved in Human Disease

DNA polymerase γ (pol γ) is the only DNA polymerase within the mitochondrion and is thus essential for replication and repair of mtDNA. POLG , the gene encoding the catalytic subunit of pol γ, is a major locus for a wide spectrum

【建议】本月讨论与整理专帖-T-A克隆，另开帖不加分！

于质粒的纯化。 recA1 减少克隆DNA的非特异性重组。 DE3 编码T7 RNA聚合酶，用于诱导T7-启动的表达系统的表达。 DeoR 可以高效吸收大片段DNA，有利于文库的构建。 Tn10 含 有四环素抗性的转座子。 OmpT 表明大肠杆菌缺乏外膜蛋白酶。缺乏外膜蛋白酶的菌株可以降低表达的外源蛋白在细菌中被降解的程度，有利于获得完整的重组蛋白。 PLys 含编码T7溶菌酶的质粒；通过抑制T7 RNA聚合酶基础表达水平来降低T7启动的表达体系的基础表达水平。 ArgF 由于突变