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文献和实验蛋白的复合物晶体结构,又基于晶体结构分析,设计并合成了特异性及体内安全性显著提高的雷公藤红素衍生物 19-048,证明了雷公藤红素的体内毒性,可以通过靶标发现及基于结构的化学优化而降低,同时表明,抑制 PRDX1 有望用于治疗结直肠癌。值得注意的是,本研究使用了汉恒生物提供的针对 PRDX1 的 CRISPR-Cas9 慢病毒。 下面,我们一起来看具体的研究结果: 首先,作者通过 RNA 测序得到用雷公藤红素处理后的差异表达基因,然后用 OTTER 富集雷公藤红素的氧化还原相关靶蛋白,发现雷公
4. 氧化还原以促使二硫键的形成 为促使蛋白的二硫键的正确形成,可以在透析液中加入氧化剂和还原剂继续透析,经常用的氧化还原剂为氧化性谷胱甘肽和还原性谷胱甘肽,比较经济的方法是使用 CuSO4 或 NaSeO3 ,但使用这种方法所形成的不正确的二硫键比前者高。因此本论文中使用氧化性谷胱甘肽和还原性谷胱甘肽。 1) 如上制备透析液,但加入氧化还原剂,于4℃保存(其中还原性谷胱甘肽和氧化性谷胱甘肽的浓度
问:请问各位高手,我想让酵母蛋白酶A失活,决定采用PCR进行DNA序列的突变,此法行的通吗?可有前人研究过? 答:国外有了"蛋白酶缺失"的用于重组蛋白表达的菌株。国内也许也有,小龙对于上游不大懂,不知道自己构建蛋白酶缺失的酵母菌是否有技术上的难度。参见一篇综述《生命的化学》2003 年23 卷1 期CHEMISTRY OF L IFE 2003,23(1) 酵母表达系统及其应用研究。 假如只是为了降低重组蛋白表达时被水解的可能,在提取液中加入蛋白酶抑制剂如PMSF可以部分解决。
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