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- 2025年07月17日
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文献和实验・ M13 Phage (Michael Blaber) Very useful background information about M13: its infection, replication, packing, cloning. If you are new to phage culture, it will be great beneficial to read this. ・ Large Scale M13
噬菌体： M13KE T7宿主细胞 ： ER2738 BL21/BLT5403/BLT5615噬菌体释放方式： M13噬菌体溶源性，不裂解宿主菌。极大地简化了每轮淘选过程中的噬菌体纯化步骤，只用简单的PEG沉淀方法即可。 T7是裂解性的，其展示的蛋白不需分泌。这一优点使更多的序列可能被展示。 但不利于提纯。融合方式：M13噬菌体N端与pIII蛋白融合，不适合克隆cDNA，因为cDNA中为oligo d(T))常位于翻译终止密码子的下游。T7噬菌体C端与T7基因10 衣壳
我根据分子克隆上的经典方法提取M13噬菌体单链DNA，第一次就成功。但是随后几次，试剂和方法都一样，在可以看见噬菌体白色沉淀的基础上（量足够多），却怎么也提不出来，最后乙醇沉淀时，一片空白。请求各位大侠指点迷津。谢谢 ! 既然首先可以成功，说明方法肯定没问题。建议： 1、检查你的试剂有无污染； 2、操作有无问题（虽然可能性小，但有时很难想到的）； 3、也可以换用其他方法，做个对照。 推荐一个快速的用NaI法噬菌体DNA提取的方法，是NEB公司噬菌体展示
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