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一、肥胖背景简介
肥胖(obesity)是指一定程度的明显超重与脂肪层过厚,是体内脂肪,尤其是甘油三酯积聚过多而导致的一种状态。由于食物摄入过多或机体代谢的改变而导致体内脂肪积聚过多,造成体重过度增长,并引起人体病理、生理改变或潜伏。随着人们生活水平的提高,饮食因素成为诱发肥胖的重要因素之一。
二、肥胖模型简介
肥胖大小鼠模型构建主要通过特定的饲养方式或遗传改造使动物产生肥胖症状,从而模拟人类的肥胖状态,用于研究肥胖的发病机制、相关疾病的发展以及潜在的治疗方法。
三、肥胖大小鼠模型构建方法
3.1、实验动物
小鼠
3.2、实验材料
高糖高脂饲料
3.3、模型构建
药物诱导
1. 谷an酸钠(MSG)诱导
新生小鼠或大鼠皮下注射MSG可诱导其产生肥胖。
高剂量谷an酸钠可以损伤下丘脑弓状核及其邻近区域,导致摄食及能量代谢紊乱,引起肥胖。谷an酸钠诱导的肥胖会出现高血糖、高脂血症和胰岛素抵抗,但这种方法会抑制肝脂质沉积,所以除了肥胖外它还可以用作非酒精性脂肪肝的动物模型。
实验方法:新生ICR乳鼠自出生当天开始每日注射谷an酸钠(MSG)连续4d,每笼1只母鼠喂养乳鼠3~6只,饲以基础饲料,任意饮氯化水,置于标准动物室。在6周龄时连续4d测定每笼摄入和散落的饲料量,计算平均饲料和水摄入量·鼠。实验期间定时测定尿糖、血糖、胰岛素、总胆gu醇(TC),TG,低密度脂蛋白-胆gu醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-胆gu醇(HDL-C)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)以及做糖耐量试验、胰岛素耐受试验并测量小鼠从口至肛men的长度、称重。用方程式:体重(g)/体长2(cm2)计算身体质量指数(BMI)。实验末所有小鼠取肝、胰、肾、眼、坐骨神经、内脏白色脂肪组织、肩胛间棕色脂肪组织、主动脉和大脑称重,然后作病理检查。
四、模型验证
①一般情况观察:每天观察动物的精神状态、皮毛光泽、活动、食欲、大便等情况,并详细记录。
②体重:每周称重1次。
③体长及Lee's指数:实验结束时,麻醉后测量体长(大鼠从鼻至肛men的长度),并根据公式[Lee's指数=体重(g)1/3×10³/体长(cm)]计算Lee's指数。
④脂肪湿重及脂肪指数:实验结束时,取体脂(网膜、睾周及肾周脂肪)并称重,计算脂肪指数。脂肪指数(%)=(肾周脂肪+睾周脂肪+网膜脂肪)/体重×100。
⑤血脂测定:实验结束时,大鼠经24h禁食麻醉自颈动脉采血,离心并分离出血清,用全自动生hua分析仪检测血清总胆gu醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆gu醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆gu醇(LDL-C)水平。
⑥肝脂测定:取肝脏左叶重约1g,在1∶9匀浆介质(甲醇∶yi醚=1∶1)中,以电动匀浆机4℃下制成10%匀浆,4℃下4000r/min离心10min,提取上清液,采用全自动生hua分析仪检测TC、TG。
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文献和实验[1] Kim Tae Jin, et al. Ginsenoside compound K ameliorates palmitate-induced atrophy in C2C12 myotubes via promyogenic effects and AMPK/autophagy-mediated suppression of endoplasmic reticulum stress.[J] J Ginseng Res, 2022, 46: 444-453.(IF=5.487)
[2] BLÜHER M. Obesity: global epidemiology andpathogenesis [J]. Nat Rev Endocrinol,2019,15( 5) : 288-298.
[3] 黄傲,胡崴,林叶新. 左旋肉碱脂肪代谢协同增效物质的研究进展[J]. 食品研究与开发,2016,37( 7) : 220-224.
大鼠麻醉后,背部脱毛,于 T9-T11 胸椎区域消毒,划约 2-3cm 纵行切口,咬除椎板,暴露硬脊膜,将大鼠固定于多功能鼠固定台,应用脊髓打击器撞击骨髓(打击高度 12mm,重量 10g)大鼠出现尾部痉挛性摆动,表明造模成功。造模后,对各组大鼠进行脊髓损伤的行为学评分,利用斜板实验评测动物脊髓损伤后神经功能恢复情况,分析在脊髓损伤不同时期的变化规律。
的毒副作用,如别嘌呤醇会导致体内脂质过氧化损伤,对肾脏、肝脏及皮肤黏膜都有较大的损害。因此,对高尿酸血症治疗新靶点和新药物的研究获得了广泛的关注,而建立稳定持续的高尿酸血症模型则是研究的重要前提。 图 1. 尿酸代谢途径[1] 尿酸是大多数动物体内嘌呤代谢的终产物,由黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)将次黄嘌呤(hypoxanthine,HX)、黄嘌呤(xanthine)等尿酸前体物质氧化而成。人体内 80% 的尿酸是由体内氨基酸等其他小分子化合物合成尿酸或分解代谢而来;20
兔颈总动脉球囊损伤术后狭窄模型,可模拟经皮腔内冠状动脉血管成形术(PTCA)术后再狭窄的发生发展。高脂饲料加球囊损伤术:目前广泛应用于腹、髂主动脉粥样硬化及颈动脉狭窄模型的建立, 球囊损伤程度的大小成为影响造模成功的关键之一。 切开颈部,分离组织颈动脉血管,颈动脉插入球囊,球囊内注入空气,球囊扩张来回抽动3次,动物模型的成熟完善建立为展开动脉粥硬化、干细胞研究、转基因技术、内皮功能等多方面的研究提供了一个切实可行的方法。最后缝合皮肤,压力泵压力能够维持,表示造模成功,术后可以通过HE验证检测。
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