- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y66772
- 国产
- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
57
- 英文名：
Dot1L-IN-1
- CAS号：
2088518-50-5
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
250mg 500mg
| 产品名称 | Dot1L-IN-1 | 产品货号 | CS-01Y66772 |
| 规格 | 250mg 500mg | CAS号 | 2088518-50-5 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | |
| 分子量 | 646.21 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Dot1L-IN-1 is a highly potent, selective and structurally novel Dot1L inhibitor with a Ki of 2 pM.Dot1L-IN-1 potently suppresses H3K79 dimethylation (IC50 = 3 nM), the direct product of the Dot1Lcatalyzed reaction, as well as the activity of the HoxA9 promoter (IC50 = 17 nM) in HeLa and Molm-13 cells, respectively[1]. Dot1L-IN-1 effectively inhibits proliferation of the human MLL-rearranged leukemia cell line MV4-11 carrying the oncogenic MLL-AF4 fusion (IC50 = 5 nM)[1].[1]. M?bitz H, et al. Discovery of Potent, Selective, and Structurally Novel Dot1L Inhibitors by a Fragment Linking Approach. ACS Med Chem Lett. 2017 Feb 14;8(3):338-343.
化学性质:
规格：250mg 500mg
CAS：2088518-50-5
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：
分子量：646.21
溶解度：Soluble in DMSO
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Dot1L-IN-1实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| 重组人PDGF R beta蛋白 | 互养蛋白3封闭多肽 |
| OSGIN2蛋白封闭多肽 | 转录因子ETV6抗体 |
| 回肠脂肪酸结合蛋白封闭多肽 | KIAA1731蛋白抗体 |
| 卡尔曼综合症基因1封闭多肽 | LYPD6B蛋白抗体 |
| 异质核糖核蛋白H封闭多肽 | 丝氨酸蛋白酶55抗体 |
| RALGPS2蛋白封闭多肽 | 非特异性细胞毒性受体蛋白1抗体 |
| 腺苷A1受体封闭多肽 | 双调蛋白/结肠直肠细胞源性生长因子抗体 |
| 20号染色体开放阅读框100封闭多肽 | 磷脂酰肌醇3磷酸激酶5Ⅲ型抗体 |
| 白介素1α封闭多肽 | RYK单克隆抗体 |
| 半胱氨酸蛋白酶8封闭多肽 | 核孔蛋白188抗体 |
| 钙调神经磷酸酶调节蛋白3封闭多肽 | 核仁和纺锤体相关蛋白1抗体 |
| 信号调节蛋白β1/SIRP-ß1封闭多肽 | Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白4抗体 |
| 肥大细胞类胰蛋白酶封闭多肽 | Dot1L-IN-1褐黑素相关蛋白ART抗体 |
| 自噬相关蛋白4D封闭多肽 | 脱氢胆固醇还原酶14抗体 |
| 组蛋白乙酰转移酶MOF抗体 | 锌指蛋白423抗体 |
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文献和实验编者按 胰腺导管腺癌是最致命的实体恶性肿瘤之一，现有抗血管生成疗法效果不佳，而血管生成拟态作为一种非内皮依赖性血管化模式，在该疾病中发挥着重要作用，但其调控机制尚不明确。 2026年3月18日，吉林大学第一医院在Gut发表的一项研究“CAV1-DOT1L axis in TAM-derived EVs orchestrates VM and sensitises PDAC to combined VM and VEGF targeting”，阐明肿瘤相关巨噬细胞，特别是M
Berger深入报道了DNA“机器”的各个组件如何拼接在一起。这一发现公布在Cell杂志上。原文检索：Mechanism of Cross-talk between H2B Ubiquitination and H3 Methylation by Dot1L③麻省总医院研究发现：患肠癌的风险与每天久坐成正相关过去，结直肠癌患者主要是50岁以上的人群，但近年来患者呈年轻化趋势，研究人员对影响年轻患者发病的因素尚不清楚。近期，一项由美国麻省总医院和哈佛医学院Long Nguyen博士领导的研究揭示，每天看电视
表观遗传修饰：想要改变基因表达？不只有 DNA，染色体也可以！
大家族：组蛋白赖氨酸甲基转移酶 (KMTs) 和蛋白质精氨酸甲基转移酶 (PRMTs) 。KMTs 家族包括 EZH2、G9a、DOT1L 和 SETD2；PRMTs 家族在哺乳动物中共有 9 个成员 (PRMT1-9)。根据添加的甲基数量，赖氨酸残基上会形成单甲基、二甲基和三甲基化基团 (Kme1、Kme2、Kme3) ，而精氨酸残基上会形成单甲基和二甲基 (Rme1/MMA、Rme2) [10][11]。 图 5.赖氨酸甲基转移酶 (KMTs) 和赖氨酸去甲基化酶 (KDM
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