StarLighter 1× dsDNA 高灵敏检测试剂盒

StarLighter 1 x dsDNA HS Assay Kit

For use with Qubits Fluorometer(all models)

(StarLighter 1x dsDNA 高灵敏检测试剂盒)

产品简介:
StarLighter 1x dsDNAHS (High sensitivity) AssayKit是一种简便快速、灵敏、准确度高的双链DNA(dSDNA)荧光定量检测试剂盒。本试剂盒包含标准品和预混好的荧光检测试剂。该试剂盒对dSDNA有高度选择性，RNA干扰小，对于dsDNA样本在0.1-100ng之间有良好的线性，相比于传统的紫外检测(A260)方法，可更精确的对DNA进行定量，免除其它物质的干扰，如RNA、蛋白等，提高实验的准确性。本试剂盒操作简单，可使用荧光酶标仪或Qubit*荧光定量仪进行检测.。

产品优势:
灵敏度高:可以对浓度为100pgmL-100ng/uL的dsDNA样品进行精确定量:

特异性强:只结合dSDNA，特异性强，不受RNA的影响，并且对一些常规的污染物如盐、游离的核苷酸、蛋白质、溶剂、去污剂等都具有极好的耐受性。

耐受性好，耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR 扩增产物而无器从反应混合物中纯化DNA.

操作简便性:操作简单，预混好的1x工作液可直接加入待测dDNA样品，通过Qubit*荧光仪进行检测，此操作在室温下即可进行。
定量更精确:在SSDNA 、RNA和单体核苷酸存在的条件下，可以选择性地检测低至100 pg/uL 的dSDNA.

产品组分

实验步骤:
1、使用荧光酶标仪进行双链DNA定量检测分析
1.1 使用前，将试剂盒中的各组分放至室温。使用前各组分均混匀。
1.2 使用前将每个试剂都混匀。其中，1xdsDNAHS Working Solution涡旋30s以上确保充分混匀。
1.3 向96孔酶标板中加入1xdsDNAHS Working Solution，标准品每孔190L，DNA样本孔可添加180-199 L的工作液。
注意:推荐使用黑色的酶标板，可有效降低反应孔之间的荧光信号干扰，

1.4取试剂盒中的dsDNAHS StandardOs1，按浓度梯度进行稀释，制成一系列稀释的dsDNA 标准品(浓度范围需在0.2ng/uL-100ng/uL)·

1.5 向96 孔酶标板中加入梯度浓度的dsDNA标准品以及待测的dsDNA样品，用移液器轻轻地吹打或震荡混匀。

1.6将酶标板置于室温环境下避光孵育2分钟。使用荧光酶标仪检测荧光信号值，选择合适的检测波段:激发波长(Ex)设置485 nm，发射波长(Em)设置为530mmm。1.7测得的dSDNA标准品的荧光信号值分别对应其浓度，绘制标准曲线;将测得的未知浓度 dsDNA样品的荧光信号值代入标准曲线中，可计算出dsDNA样品的浓度:

2、使用Qubit*荧光仪进行双链DNA定量检测分析
2.1 在使用前，将试剂盒中的各组份拿出使其温度平衡至室温。使用前将每个试剂都混匀。

2.2 使用前将每个试剂都混匀。其中，1x dsDNA HS Working Solution 涡旋30s以上确保充分混匀。
2.3 向分析管中分别加入检测工作液(180-199 ，根据加入的样本量而定，总体积200L)，标准品每孔10 W。
2.4 向分析管分别中加入10 u, dsDNA HS Standard OS0和dsDNAHS Standard Os1，以及加入一定体积(1-20)的待测dsDNA样本，使管中总体积达到200，涡旋晨荡2-3秒使溶液充分混匀。标记dsDNA标准品和待测样品的分析管。
2.5 将分析管置于室温环境下避光静置孵育2分钟
2.6 按照Qubit*荧光仪的操作说明，选择 dsDNA High Sensitivity 检测程序测定荧光信号值。

注意事项:
1.检测试剂和DNA标准品，每次使用前需摇匀。
2.荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。请务必在规定时间内完成所有样品的检测，避免荧光灭导致的结果偏差。
3.每次使用Oubit 荧光仪进行检测时，必须用配套试剂的标准品重新标定，请使用校准后的移液器，以保证结果的准确性。
4.如待测样品浓度高于100 ngu，请适当稀释后再进行检测。
5.使用Qubit'荧光仪进行检测时，需使用0.5 ml薄壁透明的分析管。