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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
3
- 英文名:
TeloPrime Full-Length cDNA Amplification Kit V2
- 保质期:
18个月
- 供应商:
北京仲黎商贸有限公司
- 保存条件:
-20
- 规格:
8-24反应
- 特异性选择具有5'-cap poly (A) 尾结构的全长mRNA;
- 高度优化的第二链 成及全长cDNA (> 2kb) 高效扩增;
- 完美兼容长读长测序平台的文库构建 (PacBio/ N anopore) ;
- 一体化 (All-in-one) 操作流程;
- Input lng-2µg total RNA ;
- 操作流程灵活,可用定制化的引物进行反转录。
首先通过oligo dT对total RNA进行长链反转录反应,合成全长的cDNA。随后,双链接头5’端突出的C与RNA/cDNA杂交双链的帽状结构反向的G碱基形成非典型的碱基配对,再通过双链特异性连接酶进行连接反应。只有帽状结构存在(如完整的RNA)以及反转录延伸到达mRNA 的5'端时,连接反应才会发生。因此,在第二链合成的过程中,只有5'端标记的,全长的cDNA才会被转化成双链cDNA。全长双链cDNA在PCR反应中使用5'和3'特异性标签PCR引物进行扩增。最后,用5’和3’端标记的特异性引物以及Lexogen新的,高度优化的TeloPrime V2 PCR流程进行扩增。
Figure 1 | TeloPrime全长cDNA扩增流程。
性能表现
与其它制备全长cDNA的方法相比,如Template Switch和Oligo Capping,TeloPrime 对5'帽子结构具有更强的特异性,使得转录起始位点的mapping具有超高的精确度 (Fig. 2)。
Figure 2 | Lexogen的TeloPrime 试剂盒可以实现高精度的转录起始位点(TSS) mapping。在mRNA测序实验中,mRNAs的5'端分别用TemplateSwitch、Oligo Capping及Teloprime的CDLL技术进行标记,获取全长cDNA,并进行文库构建及测序(illumina)。随后将TSS比对到人类基因组上,将积累的TSS read覆盖率与标准化注释的转录本长度绘制成图,分别显示表达量高的500个基因的TSS mapping信息。
订购信息
| 货号 | 产品 | 规格 |
| 013.08 | TeloPrime Full-Length cDNA Amplification Kit V2, 8 preps | 8 |
| 013.24 | TeloPrime Full-Length cDNA Amplification Kit V2, 24 preps | 24 |
| 018.16 | TeloPrime PCR Add-on Kit V2, 16 rxn | 16 |
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