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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
瓦兰生物
- 服务名称:
质粒
- 规格:
2ug
pAd-PE2货号:JN040100259
产品规格 √ 小提(≥2ug) 中提(≥35ug) 大提(≥500ug)
质粒使用方法:
一:质粒
① 收到液体质粒后请瞬离样晶筐,让液体质粒不要吸附在营壁上;
② 取出感受态细胞于冰上融化,取2µl的质拉稀释液加到lOOµl感受态细胞里,;水浴30min;
③ 42℃水浴热激60-905,再冰浴Smin,加入700µl的无抗培养基,37。培养箱180rpm培养30min;
④ SOOOrpm离心3min,倒掉上清,留下lOOµl左右的上清轻打重悬沉淀,均匀的涂布在对应抗性的LB平板上;
⑤ 倒置培养过夜后,挑取单个菌落到对应抗性的LB液体培养基申过夜37。培养箱180rpm培养,根据实验需求抽提DNA。
⑥ 注意事项:倒置过夜培养若没有菌落生长,可取lOµl的质粒稀释液重复上述实验过程;若菌落太多,则质粒稀释10倍后重复上述实验过程。
二: 甘油菌种
① 在洁净台用酒精灯将接种环烧热晾;京后,蘸取甘油菌种在对应抗性的固体培养皿上四区划线;
② 挑取线上的单个菌落接种到对应液体培养基申;
③ 根据实验需求在37。培养箱180rpm培养,根据实验需求抽提DNA。
三:穿刺菌种
①拿到的穿刺菌可以看到明显的穿刺线,挑取穿剌线上的菌接种到相应的培养墓中,液体培养后四区划线,挑取线上的单个克隆到对应液体培养基申,根据实验需求在37。培养箱 180rpm培养,根据实验需求抽提DNA。
温馨提醒:以上操作都需在洁净台无菌操作,收到样晶扩大培养后,需根据对应的图谱迪行酶切或测序鉴定,鉴定正确后追行下-步实验!!!
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文献和实验暂无文献
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