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- 2026年04月29日
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原位杂交(in situ hybridization，ISH)指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
荧光标记探针一般用直接法标记，可省去信号放大系统，减少试剂投入且保障更大程度的特异性，同时也有信号清晰，背景低及方法简单易于操作等优点。科沿有道可提供多种常用探针品种，也可以根据需要进行个性化探针定制（miRNA探针、mRNA探针、lncRNA探针、DNA探针、端粒探针、染色体探针等）。
①组织：新鲜或固定（10%中性甲醛、4%多 聚 甲 醛）组织样本；
②细胞：新鲜（大于10^6）或固定（10%中性甲醛、4%多 聚 甲 醛）细胞样本；
③切片：石蜡切片，冰冻切片以及细胞爬片，涂片；
④实验信息：基因名称及ID。
二、结果交付内容:①染色后的切片；
②探针序列；
③电子图片；
④实验报告（实验仪器、试剂、方法、结果、结论）。
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文献和实验, In situ PCR & in situ RT-PCR, PRINS, visualization and measurement ・ Chromosome Preparation for in situ Hybridization (ISH) (Wheat Genetics Resource Center) ・ Tissue Preparation for In Situ Hybridization (Wilcox Lab) ・
霍一刀hxs 各位高手： 对于某一特定的RNA，通过何种方法判断其所在细胞内的位置？多谢。 zoeru2007 原位杂交吧。。。 sbch1532 霍一刀hxs wrote: 各位高手： 对于某一特定的RNA，通过何种方法判断其所在细胞内的位置？多谢。 原位杂交可以 霍一刀
位PCR技术应用成功的第一篇报道是对感染绵羊中枢神经系统visna病毒在绵羊脉络从一细胞中检查，通过PCR扩增，仅用150碱基对的短探针就可通过ISH检查到了细胞内的visna病毒。从开始在试管内细胞行PCR扩增后再涂片做ISH(原位杂交)检查，已发展到用福尔马林固定、石蜡切片的常规病理组织方法做原位PCR检查。有传统的标记探针的原位PCR法（间接法），也有将标记物先标记PCR的引物，让标记物扩增后再行ISH检查的直接法。因此，目前就原位PCR方法而言，尚未能获得统一，也即未能比较出哪一种方法最可靠
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