KIF2C (phospho Ser95) 多克隆抗体

抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods

虽然固定对于保持组织形态至关重要，但该过程也可能对免疫组化/免疫细胞化学检测产生负面影响。固定会改变蛋白质的生化性质，导致目标表位被掩盖，从而无法与一抗结合。表位被掩盖的原因可能是表位内氨基酸的交联、表位附近或位点无关肽段的交联、表位构象的改变或抗原静电荷的改变。抗原修复是指任何能够逆转表位掩盖并恢复表位-抗体结合的技术。 抗原修复技术 抗原修复的必要性取决于多种因素，包括但不限于目标抗原、所用抗体、组织类型以及固定方法和时间。由于多克隆抗体能够识别多个表位，因此与单克隆抗体相比，它们无需抗原

【讨论】 抗体工程技术讨论

抗体工程： 抗体研究领域的进展大致可分为3个阶段： （1）以1890年Behring发现白喉抗毒素为代表，其特点是用抗原免疫动物来获得多克隆抗体。 （2）以1975年Kohler创建杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表。 （3）以1994年Winter以基因工程方法制备抗体为代表。这是抗体研究领域出现的又一次技术革命，它不用人工免疫动物和细胞融合技术，完全用基因工程技术制备人源性抗体，而且还能利用基因转移和表达技术，通过细菌发酵或转基因动物、植物大规模生产抗体。在此基础上发展成抗体

石蜡切片免疫组织化学染色

5分钟，95%、90%、80%和70%乙醇中分别浸泡2分钟，PBS漂洗3次，每次3分钟，置蒸馏水中待用。 3．抗原修复4．细胞膜打孔 切片置于0.1%~0.3%TritonX-100中，室温浸泡25分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。TritonX-100为去污剂，其脂溶性可使细胞膜穿孔，增加细胞膜对抗体的渗透性。检测细胞膜抗原时可免去此步骤。 5．灭活内源性酶及封闭内源性生物素6．非免疫血清封闭 抗体能被组织切片中富有电荷的胶原和结缔组织成分吸附。从而导致背景着色，为了防止这种现象