Neospiramycin I

Neospiramycin I

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  • ¥600 - 3200
  • 上海莼试
  • CS-01Y72538
  • 国产
  • 2025年07月13日
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      47

    • 英文名

      Neospiramycin I

    • CAS号

      70253-62-2

    • 供应商

      上海莼试

    • 保存条件

      -20°C

    • 规格

      1 mg 5 mg 10 mg

    本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
    产品名称Neospiramycin I产品货号CS-01Y72538
    规格1 mg 5 mg 10 mgCAS号70253-62-2
    含量>95.00%分子式C36H62N2O11
    分子量698.9用途仅供科研研究使用
    化学性质:         
    Neospiramycin I
     
    Neospiramycin I规格:1 mg 5 mg 10 mg
    CAS:70253-62-2
    别名:N/A
    化学名:N/A
    分子式:C36H62N2O11

    Neospiramycin I
    分子量:698.9
    溶解度:DMSO: soluble
    储存条件:-20°C
    General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the   ultrasonic bath for a while.
    Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or   blue ice upon request
    产品描述:
     
    Neospiramycin I
     
    Neospiramycin I is a macrolide antibiotic and derivative of spiramycin I.1 It is active against the macrolide-sensitive KB210, but not the macrolide-resistant KB224, strain of S. aureus (MICs = 3.12 and >100 µg/ml, respectively), as well as B. cereus, B. subtilis, M. luteus, E. coli, and K. pneumoniae (MICs = 1.56, 3.12, 3.12, 0.2, 50, and 12.5 µg/ml, respectively). Neospiramycin I binds to E. coli ribosomes with an IC50 value of 1.2 µM. It protects against mortality in a mouse model of S. pneumoniae type III infection (ED50 = 399.8 mg/kg).21.Sano, H., Inoue, M., and  mura, S.Chemical modification of spiramycins. II. Synthesis and antimicrobial activity of 4’-deoxy derivatives of neospiramycin I and their 12-(Z)-isomersJ. Antibiot. (Tokyo)37(7)738-749(1984) 2.Sano, H., Inoue, M., Yamashita, K., et al.Chemical modification of spiramycins. I. Synthesis of the acetal derivatives of neospiramycin IJ. Antibiot. (Tokyo)36(10)1336-1344(1983).
    使用方法: 
    Neospiramycin I
     
    1. 常用筛选浓度
      注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
      一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
    2. 杀灭曲线的建立
      注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
    1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
    2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
    3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
    4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
    5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
    3. 稳定转染细胞的筛选
    1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
      注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
    2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
    3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
    4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
    5) 之后更换正常培养基培养即可。
    公司正在出售的产品:
     
    Neospiramycin I
     
    Boc-Tyr(Me)-OHcFMS Receptor Inhibitor II
    BI-4020白色念珠(CAN)核酸检测试剂盒
    Squarunkin A hydrochloride金黄色葡萄球(SA)核酸检测试剂盒
    EMD-1214063艰难梭(TCD-B)核酸检测试剂盒
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    Protein kinase inhibitors 1副溶血性弧(VP)核酸检测试剂盒
    RORγt Inverse agonist 3霍乱弧O139(VC O139)核酸检测试剂盒
    NRC-2694霍乱弧O1(VC O1)核酸检测试剂盒
    JNJ-38877605志贺氏(SH)核酸检测试剂盒
    Vecabrutinib (SNS-062)Neospiramycin I鼠疫杆(YP-PLA/CA/3A)核酸检测试剂盒
    Darodipine (PY 108-068)鼠疫杆(YP)核酸检测试剂盒
    大豆内源基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法)沙门氏SPP-spec核酸检测试剂盒

    蛋白酶抑制剂混合物实验步骤: 
    Neospiramycin I
     
    (1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
    (2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
    (3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
    (4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
    (5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
    (6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
    (7)10,000rpm,4℃离心20min
    (8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
    (9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
    (10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
    (11)12,000rpm,4℃离心20 min
    (12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
    (13)加200ul的DEPC处理水溶解
    (14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)


     

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