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- 上海莼试
- CS-01Y76118
- 国产
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
46
- 英文名：
Alizapride-13C-d3 (hydrochloride)
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
500 µg 1 mg 5 mg
| 产品名称 | Alizapride-13C-d3 (hydrochloride) | 产品货号 | CS-01Y76118 |
| 规格 | 500 µg 1 mg 5 mg | CAS号 | N/A |
| 含量 | >99.00% | 分子式 | C15[13C]H18D3N5O2·HCl |
| 分子量 | 355.9 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Alizapride-13C-d3 is intended for use as an internal standard for the quantification of alizapride by GC- or LC-MS. Alizapride is a dopamine D2 receptor antagonist (Ki = 66-340 nM in radioligand binding assays).1 It is selective for dopamine D2 over α1-, α2-, and β-adrenergic receptors (IC50s = >10 µM for all). It reduces decreases in gastrointestinal transit induced by dopamine , apomorine, or bromocriptine in rats when administered at a dose of 5 mg/kg.2 Formulations containing alizapride have been used in the treatment of pre- and postoperative nausea.1.Chivers, J.K., Gommeren, W., Leysen, J.E., et al.Comparison of the in-vitro receptor selectivity of substituted benzamde drugs for brain neurotransmitter receptorsJ. Pharm. Pharmacol.40(6)415-421(1988) 2.Dhasmana, K.M., VillalÓn, C.M., Zhu, Y.N., et al.The role of dopamine (D2), α and β-adrenoceptor receptors in the decrease in gastrointestinal transit induced by dopamine and dopamine-related drugs in the ratPharmacol. Res.27(4)335-347(1993)
化学性质:
规格：500 µg 1 mg 5 mg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C15[13C]H18D3N5O2·HCl
分子量：355.9
溶解度：DMSO: soluble,Methanol: soluble,Water: soluble
储存条件：-20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Alizapride-13C-d3 (hydrochloride)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| Biotinyl-α-CGRP (mouse, rat) | Mefenamic acid D4 |
| CAY10498 | 端粒酶(TE)检测试剂盒 |
| BMS-927711 | 端粒保护蛋白1(POT1)检测试剂盒 |
| BACE1-IN-4 | 毒蕈碱型乙酰胆碱受M2(mAChRM2)自身抗检测试剂盒 |
| Pindolol | 毒蕈碱型乙酰胆碱受亚型M3(M-AChR M3)检测试剂盒 |
| 5-HT7 agonist 1 | 毒蕈碱型乙酰胆碱受(M-AChR)检测试剂盒 |
| Metergoline | 毒性休克综合征毒素1(TSST-1)检测试剂盒 |
| Firocoxib | Rat 17-ketosteroids, 17-KS Elisa Kit |
| Perlapine | 端粒酶逆转录酶(TERT)检测试剂盒 |
| Beperidium iodide (SX 810) | 端粒重复序列结合因子1(TERF1)检测试剂盒 |
| Azaphen | 端粒重复序列结合因子2(TERF2)检测试剂盒 |
| Cevimeline | 对甲酸(PABA)检测试剂盒 |
| DAU 5884 hydrochloride | Alizapride-13C-d3 (hydrochloride)对称二甲基精氨酸(SMDA)检测试剂盒 |
| Mirogabalin besylate (DS 5565 besylate) | 氧磷酶(PON)检测试剂盒 |
| 多巴胺D1受(D1R)检测试剂盒 | 氧磷酶-3(PON3)检测试剂盒 |
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文献和实验Guanidine Hydrochloride Purification of Proteins From SDS
Pepstatin A (2.0 mg/ml)10 ml Leupeptin (1.0 mg/ml)10 ml Aprotinin (5.0 mg/ml)(Protease Inhibitor Cocktail Sigma #P8340)Denaturation Buffer6 M guanidine hydrochloride 57.3 g G-HCl20 mM Hepes 7.9 2 ml 1M Hepes pH 7.910 mM KCl 0.074 g KCl0.5 mM DTT 100 ml 0.5 M
Guanidine Hydrochloride Purification of Proteins From SDS PAGE
(Sigma #P7626) 10 ml Pepstatin A (2.0 mg/ml) 10 ml Leupeptin (1.0 mg/ml) 10 ml Aprotinin (5.0 mg/ml) (Protease Inhibitor Cocktail Sigma #P8340) Denaturation Buffer 6 M guanidine hydrochloride 57.3 g G-HCl 20 mM Hepes 7.9 2 ml 1M Hepes pH 7.9 10 mM
Packed column subcritical and/or supercritical fluid chromatography (p-sub or pSFC) has been used as a powerful chiral separation technique, whereby a mobile phase produces low viscosity, a high diffusion coefficient, and a solvating power. P
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