- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y75913
- 国产
- 2025年07月15日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20
- 英文名：
Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat TFA
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
500μg 1mg 5mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
产品描述:
Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat (TFA) is a 37 amino acid calcitonin family of neuropeptide, acts through calcitonin receptor-like receptor (CRLR).Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat (TFA) belongs to the calcitonin family of neuropeptides which also includes adrenomedullin, amylin, calcitonin, intermedin and calcitonin receptor-stimulating peptide. Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) has two isoforms (αCGRP and βCGRP), and acts through calcitonin receptor-like receptor (CRLR)[1]. Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) plays a key role in migraine pathophysiology and is associated with activation of the trigeminovascular system. CGRP prossibly acts postjunctionally in these areas putatively involved in primary headaches[2].Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat (TFA) is a potent inducer of oedema in rat orofacial tissue. CGRP (100 μL; 8-33 pM) induces a rapidly developing (5-15min) and long-lasting (6h), dose-dependent oedema in the rat cheek. CGRP induces a smaller oedematogenic effect in the rat hind paw also blocked by the CGRP antagonist. CGRP (16 pM) potentiates the oedema induced by co-injected substance P (3.7 nM)[3].[1]. S. Ghatta, et al. Calcitonin gene-related peptide: Understanding its role. Educational Forum. 20.6.2004. [2]. Eftekhari S, et al. Calcitonin gene-related peptide (CGRP) and its receptor components in human and rat spinal trigeminal nucleus and spinal cord at C1-level. BMC Neurosci. 2011 Nov 10;12:112. [3]. Queiroz BFG, et al. Calcitonin-gene related peptide is a potent inducer of oedema in rat orofacial tissue. Neuropeptides. 2018 Apr;68:43-48.
化学性质:
规格：500μg 1mg 5mg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C162H262N50O52S2.C2HF3O2
分子量：3920.32
溶解度：H2O: 10 mg/mL (2.55 mM)
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat TFA实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| 产品名称 | Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat TFA | 产品货号 | CS-01Y75913 |
| 规格 | 500μg 1mg 5mg | CAS号 | N/A |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C162H262N50O52S2.C2HF3O2 |
| 分子量 | 3920.32 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat (TFA) is a 37 amino acid calcitonin family of neuropeptide, acts through calcitonin receptor-like receptor (CRLR).Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat (TFA) belongs to the calcitonin family of neuropeptides which also includes adrenomedullin, amylin, calcitonin, intermedin and calcitonin receptor-stimulating peptide. Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) has two isoforms (αCGRP and βCGRP), and acts through calcitonin receptor-like receptor (CRLR)[1]. Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) plays a key role in migraine pathophysiology and is associated with activation of the trigeminovascular system. CGRP prossibly acts postjunctionally in these areas putatively involved in primary headaches[2].Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat (TFA) is a potent inducer of oedema in rat orofacial tissue. CGRP (100 μL; 8-33 pM) induces a rapidly developing (5-15min) and long-lasting (6h), dose-dependent oedema in the rat cheek. CGRP induces a smaller oedematogenic effect in the rat hind paw also blocked by the CGRP antagonist. CGRP (16 pM) potentiates the oedema induced by co-injected substance P (3.7 nM)[3].[1]. S. Ghatta, et al. Calcitonin gene-related peptide: Understanding its role. Educational Forum. 20.6.2004. [2]. Eftekhari S, et al. Calcitonin gene-related peptide (CGRP) and its receptor components in human and rat spinal trigeminal nucleus and spinal cord at C1-level. BMC Neurosci. 2011 Nov 10;12:112. [3]. Queiroz BFG, et al. Calcitonin-gene related peptide is a potent inducer of oedema in rat orofacial tissue. Neuropeptides. 2018 Apr;68:43-48.
化学性质:
规格：500μg 1mg 5mg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C162H262N50O52S2.C2HF3O2
分子量：3920.32
溶解度：H2O: 10 mg/mL (2.55 mM)
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat TFA实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| EP4 Receptor Antagonist 1 | 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin D1 |
| ATB-343 | MIP-2 巨噬细胞炎性蛋白2ELISA检测试剂盒 |
| IL-17A antagonist 1 | IL-18 白介素18ELISA检测试剂盒 |
| 10-methyl-9-(phenoxycarbonyl) Acridinium (trifluoromethylsul | PF-4/CXCL4 血小板因子4ELISA检测试剂盒 |
| Neoseptin 3 | CTGF 结缔组织生长因子ELISA检测试剂盒 |
| ND-336 | TF 组织因子ELISA检测试剂盒 |
| DAz-2 | CRP C反应蛋白ELISA检测试剂盒 |
| Virustomycin A | tumor specific transplantation antigen, TSTA Elisa Kit |
| 2S-Eriodictyol | MEC/CCL28 粘膜相关上皮趋化因子ELISA检测试剂盒 |
| 11(Z),14(Z)-Eicosadienoic Acid methyl ester | MPIF-1/CCL23 抑制因子1ELISA检测试剂盒 |
| alpha-1 antitrypsin fragment | Eotaxin 2/CCL24 嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 2ELISA检测试剂盒 |
| Telomycin | LFA-2/CD2 淋巴细胞功能相关抗原2ELISA检测试剂盒 |
| N-Phenylthiourea | Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat TFABAFF-R B细胞活化因子受ELISA检测试剂盒 |
| MK-0941 | LR 白细胞调节素ELISA检测试剂盒 |
| TIMP-1 基质金属蛋白酶抑制因子1ELISA检测试剂盒 | MMP-4 基质金属蛋白酶4ELISA检测试剂盒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
Characterization of CGRP Receptor Binding
for calcitonin gene‐related peptide (CGRP) and islet amyloid polypeptide (IAPP) in mammalian lung: Species variation and binding of truncated CGRP and IAPP. Endocrinology. 133:2351‐2361.
Production of Antisera Using Peptide Conjugates
of different crosslinking agents utilized for the coupling of peptides to carrier proteins; examples of each type are covered in this chapter. In the case of larger neuropeptides, such as calcitonin gene-related peptide (CGRP
in four different osteoblastic cell lines and in isolated neonatal mouse calvarial bone cells has been examined. In the rat osteosarcoma cell line UMR-106-01, vasoactive intestinal polypeptide (VIP, 0.001-1 microM), calcitonin gene-related peptide (CGRP, 0.3-30 nM
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) (83-119), rat TFA
￥600 - 3200
