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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
35
- 英文名:
Ambenonium dichloride
- CAS号:
115-79-7
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at RT
- 规格:
10mg 50mg
| 产品名称 | Ambenonium dichloride | 产品货号 | CS-01Y75710 |
| 规格 | 10mg 50mg | CAS号 | 115-79-7 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C28H42Cl4N4O2 |
| 分子量 | 608.48 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Ambenonium dichloride规格:10mg 50mg
CAS:115-79-7
别名:
化学名:2,2'-(oxalylbis(azanediyl))bis(N-(2-chlorobenzyl)-N,N-diethylethanaminium) chloride
分子式:C28H42Cl4N4O2
分子量:608.48
溶解度:Soluble to 100 mM in H2O
储存条件:Store at RT
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| AZD3229 Tosylate | Acetyl Podocarpic Acid Anhydride |
| 24(S)-hydroxy Cholesterol | IgG 免疫球蛋白GELISA检测试剂盒 |
| Abarelix Acetate | IgE 免疫球蛋白EELISA检测试剂盒 |
| Angiotensin 1/2 (1-5) | MMP-5 基质金属蛋白酶5ELISA检测试剂盒 |
| β-Interleukin II (44-56) | TIMP-1 基质金属蛋白酶抑制因子1ELISA检测试剂盒 |
| AC-4-130 | TE 端粒酶ELISA检测试剂盒 |
| Boc-Thr(Bzl)-OH | LIFR 白血病抑制因子受ELISA检测试剂盒 |
| Fmoc-N-Me-Phe-OH | Porcine thyrotropin-releasing hormone, TRH Elisa Kit |
| Boc-β-HoSer(Bzl)-OH | BNP 脑钠素/脑钠尿肽ELISA检测试剂盒 |
| H-D-HoPhe-OH | ICAM-2/CD102 细胞间粘附分子2ELISA检测试剂盒 |
| Fmoc-β-Homo-Pro-OH | bFGF 碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒 |
| Ac-Gly-OEt | sE-selectin 可溶性E选择素ELISA检测试剂盒 |
| H-Leu-2-Chlorotrityl Resin | Ambenonium dichloridesICAM-1 可溶性细胞间粘附分子1ELISA检测试剂盒 |
| VU 0155069 | sVCAM-1 可溶性血管细胞粘附分子1ELISA检测试剂盒 |
| CORT 皮质酮/肾上腺酮ELISA检测试剂盒 | IgM 免疫球蛋白MELISA检测试剂盒 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验Saline 生理盐水 3.9~4.1 Methanol 甲醇 3.8~4.1 Methane dichloride 二氯乙烷 3.8~4.1 Chloroform* 氯仿 3.8~4.1 Propanol 丙醇 3.7~4.0 Ethanol** 乙醇 3.6~3.9 Isobutanol 异丁醇 3.6~3.9 Formamide 甲酰胺 3.6~3.9 Methylene dichloride 二氯甲烷 3.6~3.9 Butanol 丁醇 3.5~3.8 Isopropanol
基甲酰胺 3.8~4.2 Saline 生理盐水 3.9~4.1 Methanol 甲醇 3.8~4.1 Methane dichloride 二氯乙烷 3.8~4.1 Chloroform* 氯仿 3.8~4.1 Propanol 丙醇 3.7~4.0 Ethanol** 乙醇 3.6~3.9 Isobutanol 异丁醇 3.6~3.9 Formamide 甲酰胺 3.6~3.9 Methylene
性肠梗阻、尿路梗塞和 支气管哮喘 患者。 其他易逆性抗胆碱酯酶药 吡啶斯的明(pyridostigmine)作用较新斯的明稍弱。主要用于治疗重症肌无力,因肌力改善作用维持较久,故适于晚上用药。也可用于手术后腹气胀和尿潴留。过量中毒的危险较少。禁忌证同新斯的明。 安贝氯铵(ambenonium,酶抑宁mytelase)的抗胆碱酯酶作用和兴奋骨骼肌作用都较新斯的明强,作用持续时间也较长,可口服给药。主要用于重症肌无力,不良反应和应用时注意事项与新斯的明相似
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