S-(+)-Marmesin ((+)-Marmesin)

本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！

产品名称	S-(+)-Marmesin ((+)-Marmesin)	产品货号	CS-01Y77400
规格	5 mg 10 mg 25 mg 50 mg 100 mg	CAS号	13849-08-6
含量	>99.50%	分子式	C14H14O4
分子量	246.26	用途	仅供科研研究使用

化学性质:   

       
S-(+)-Marmesin ((+)-Marmesin)规格：5 mg 10 mg 25 mg 50 mg 100 mg
CAS：13849-08-6
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C14H14O4

分子量：246.26
溶解度：DMSO : 2 mg/mL (8.12 mM)
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the   ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or   blue ice upon request
产品描述: 

 
S-(+)-Marmesin is a natural coumarin, exhibiting COX-2/5-LOX dual inhibitory activity.S-(+)-Marmesin ((+)-marmesin) shows affinity at the recombinant psoralen synthase, with a Km of 1.5 ± 0.5 μM, exceeding the substrate affinities of other enzymes of the CYP71 subfamily involved in plant secondary metabolism[1]. S-(+)-Marmesin ((+)-marmesin) shows COX-2/5-LOX dual inhibitory activity[2].[1]. Larbat R, et al. Molecular cloning and functional characterization of psoralen synthase, the first committed monooxygenase of furanocoumarin biosynthesis. J Biol Chem. 2007 Jan 5;282(1):542-54. Epub 2006 Oct 26. [2]. Kim JS, et al. Chemical constituents of the root of Dystaenia takeshimana and their anti-inflammatory activity. Arch Pharm Res. 2006 Aug;29(8):617-23.
使用方法: 

 
1. 常用筛选浓度
　　注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
　　一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
　　注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
　　注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品: 

 

CBL0137 (hydrochloride)	(H-Asp-Glu-Val-Asp)₂-Rhodamine 110
(Hyp³,β-(2-thienyl)-Ala⁵,Tyr(Me)⁸-psi(CH₂NH)Arg⁹)-Bradykinin	肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配1(TRAIL-R1)ELISA检测试剂盒
(Lys¹⁵)-Amyloid β-Protein (15-21)	肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配3(TRAIL-R3)ELISA Kit
(Nle⁸·¹⁸,Tyr³⁴)-pTH (1-34) amide (bovine)	可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配(sTRAIL)试剂盒 ELISA
(Pyr¹¹)-Amyloid β-Protein (11-40)	肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配4(TRAIL-R4)检测试剂盒
(Ser(tBu)⁶,Azagly¹⁰)-LHRH	尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA检测试剂盒
(Tyr⁰)-Neurokinin A	尿激酶型纤溶酶原激活物受(PLAUR/uPAR)ELISA Kit
(β-Ala⁸)-Neurokinin A (4-10)	Mouse anti-thrombin receptor, ATR Elisa Kit
1,2-O-Dihexadecyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine	L选择素(L-Selectin/CD62L)试剂盒 ELISA
1-Palmitoyl-rac-glycero-3-phosphocholine	肿瘤坏死因子β(TNF-β)检测试剂盒
4-(Fmoc-amino)-1-methyl-1H-imidazole-2-carboxylic acid	肿瘤坏死因子可溶性受Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA Kit
4-Piperidylacetylaminomethyl resin (200-400 mesh, 0.3-0.6 mmol/g)	肿瘤坏死因子可溶性受Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA检测试剂盒
7-Aminoheptanoic acid	S-(+)-Marmesin ((+)-Marmesin)基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)试剂盒 ELISA
3-Propylxanthine	基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)检测试剂盒
血管生成素受Tie1(ANG-R-Tie1)试剂盒 ELISA	基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA Kit

蛋白酶抑制剂混合物实验步骤: 

 
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)