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- 上海莼试
- CS-01Y76905
- 国产
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
Nociceptin (trifluoroacetate salt)
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
500 μg 1 mg 5 mg
规格：500 μg 1 mg 5 mg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
Nociceptin (trifluoroacetate salt)分子式：C79H129N27O22.XCF3COOH
分子量：1809
溶解度：DMF: 20 mg/ml,DMSO: 30 mg/ml,PBS (pH 7.2): 10 mg/ml
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
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本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
| 产品名称 | Nociceptin (trifluoroacetate salt) | 产品货号 | CS-01Y76905 |
| 规格 | 500 μg 1 mg 5 mg | CAS号 | N/A |
| 含量 | >95.00% | 分子式 | C79H129N27O22.XCF3COOH |
| 分子量 | 1809 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Nociceptin is a 17 amino acid neuropeptide involved in a variety of biological systems including pain, memory, stress responses, anxiety, locomotion, and feeding behavior.1 It is an endogenous ligand of the NOP1 (ORL1) receptor (Ki = 88 μM in CHO cells) and, though an opioid-related peptide, does not interact directly at the classic μ-, κ-, or δ-opioid receptors.11.Mogil, J.S., and Pasternak, G.W.The molecular and behavioral pharmacology of the orphanin FQ/nociceptin peptide and receptor familyPharmacol. Rev.53(3)381-415(2001)
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| SCH 23390 hydrochloride | Cediranib maleate (AZD-2171 maleate) |
| JH-II-127 | 吡啶交联物(PY)检测试剂盒 |
| Dovitinib (TKI258) Lactate | 骨桥素(OPN)试剂盒elisa |
| LDN 193189 dihydrochloride | 骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)检测试剂盒 |
| CGP 77675 (hydrate) | 促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒elisa |
| BIBU 1361 dihydrochloride | 转铁蛋白受(TFR/CD71)试剂盒ELISA |
| Tyrphostin AG 1296 | 半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA检测试剂盒 |
| ON 146040 | Butyrophilin Subfamily 1, Member A1(BTN1A1)ELISA Kit |
| Glesatinib hydrochloride | 脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA检测试剂盒 |
| PD 90780 (hydrate) | Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)试剂盒ELISA |
| FIIN-3 | 促卵泡素(FSH)检测试剂盒 |
| PLX5622 | 骨胶原交联(Cr)检测试剂盒elisa |
| Dovitinib-d8 | Nociceptin (trifluoroacetate salt)血红素氧合酶2(HO-2)试剂盒elisa |
| N-acetyl-5-Aminosalicylic Acid | 分泌型免疫球蛋白A(sIgA)检测试剂盒 |
| β内啡肽(β-EP)检测试剂盒 | 蛋白激酶B(PKB)ELISA检测试剂盒 |
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文献和实验at lower salt concentrations, whereas many primer pairs producing short amplification products worked better at higher salt concentrations. This is illustrated in the three figures below in which there is a realtive shift in the intensity of the products
The presence of a redundant lipolytic system of bile salt-activated lipase (BAL) and pancreatic lipase results in the concerted action of these lipolytic enzymes during intestinal dietary fat digestion processes (1 ). Because of its wide
盐腺 salt gland （ 1）为海产软骨鱼类、爬行类和鸟类的 NaCl分泌腺，在软骨鱼类有开口于直肠的直肠腺，在爬行类和鸟类有，开口于鼻腔的鼻腺，龟的开口于眼窝的泪腺，已变为盐腺。盐腺的分泌液主要含 NaCl，排出比海水浓度还要大的溶液。分泌细胞中有大量的线粒体，与哺乳类的肾小管细胞的构造非常相似。 Na－ K－ ATP 酶活性高。用海水养鸭时，其盐腺可发达增大数倍。 （ 2）指树苗（主要是叶）向表面分泌盐类的构造。亦称钙腺。盐腺的构造因种属而异
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