- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y76104
- 国产
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
27
- 英文名：
Colivelin TFA
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
500μg 1mg 5mg 10mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
化学性质:
Colivelin TFA规格：500μg 1mg 5mg 10mg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C119H206N32O35.C2HF3O2
分子量：2759.12
溶解度：H2O: 25 mg/mL (9.06 mM)
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Colivelin (TFA) is a neuroprotective peptide and activator of STAT3. STAT3 Amyloid-βColivelin (TFA) is a hybrid peptide composed of ADNF and AGA-(C8R)HNG17, a potent Humanin (HN) derivative[2]. Humanin (HN) and its derivatives, such as Colivelin (TFA), suppress neuronal death induced by insults related to Alzheimer's disease (AD) by activating STAT3[1]. Colivelin (TFA) completely suppresses death induced by overexpressed FAD-causative genes and A 1-43 at a concentration of 100 fM, whereas AGA-(C8R)HNG17 does so at a concentration of 10 pM[2].Humanin (HN) and its derivatives, such as Colivelin (TFA) also ameliorate functional memory impairment of mice induced by anticholinergic drugs or soluble toxic amyloid-β (Aβ)[1]. Intracerebroventricular administration of Colivelin (TFA) not only completely suppresses impairment in spatial working memory induced by repetitive intracerebroventricular injection of Aβ25-35 or Aβ1-42, but also it antagonizes neuronal loss in the CA1 region of hippocampus induced by hippocampal injection of Aβ1-42[2].[1]. Yamada M, et al. Nasal Colivelin treatment ameliorates memory impairment related to Alzheimer's disease. Neuropsychopharmacology. 2008 Jul;33(8):2020-32. [2]. Chiba T, et al. Development of a femtomolar-acting humanin derivative named colivelin by attaching activity-dependent neurotrophic factor to its N terminus: characterization of colivelin-mediated neuroprotection against Alzheimer's disease-relevant insults in vitro and in vivo. J Neurosci. 2005 Nov 2;25(44):10252-61.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
| 产品名称 | Colivelin TFA | 产品货号 | CS-01Y76104 |
| 规格 | 500μg 1mg 5mg 10mg | CAS号 | N/A |
| 含量 | >99.00% | 分子式 | C119H206N32O35.C2HF3O2 |
| 分子量 | 2759.12 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Colivelin TFA规格：500μg 1mg 5mg 10mg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C119H206N32O35.C2HF3O2
分子量：2759.12
溶解度：H2O: 25 mg/mL (9.06 mM)
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Colivelin (TFA) is a neuroprotective peptide and activator of STAT3. STAT3 Amyloid-βColivelin (TFA) is a hybrid peptide composed of ADNF and AGA-(C8R)HNG17, a potent Humanin (HN) derivative[2]. Humanin (HN) and its derivatives, such as Colivelin (TFA), suppress neuronal death induced by insults related to Alzheimer's disease (AD) by activating STAT3[1]. Colivelin (TFA) completely suppresses death induced by overexpressed FAD-causative genes and A 1-43 at a concentration of 100 fM, whereas AGA-(C8R)HNG17 does so at a concentration of 10 pM[2].Humanin (HN) and its derivatives, such as Colivelin (TFA) also ameliorate functional memory impairment of mice induced by anticholinergic drugs or soluble toxic amyloid-β (Aβ)[1]. Intracerebroventricular administration of Colivelin (TFA) not only completely suppresses impairment in spatial working memory induced by repetitive intracerebroventricular injection of Aβ25-35 or Aβ1-42, but also it antagonizes neuronal loss in the CA1 region of hippocampus induced by hippocampal injection of Aβ1-42[2].[1]. Yamada M, et al. Nasal Colivelin treatment ameliorates memory impairment related to Alzheimer's disease. Neuropsychopharmacology. 2008 Jul;33(8):2020-32. [2]. Chiba T, et al. Development of a femtomolar-acting humanin derivative named colivelin by attaching activity-dependent neurotrophic factor to its N terminus: characterization of colivelin-mediated neuroprotection against Alzheimer's disease-relevant insults in vitro and in vivo. J Neurosci. 2005 Nov 2;25(44):10252-61.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| Boc-Gln-Gln-OH | Germacrene D |
| Chlorquinaldol | Fukutin蛋白检测试剂盒 FKTN ELISA Kit |
| Pentamidine | Fruitless蛋白检测试剂盒 FRU ELISA Kit |
| O-Methylviridicatin | Frataxin蛋白检测试剂盒 FXN ELISA Kit |
| N-cis-tetradec-9Z-enoyl-L-Homoserine lactone | Fritz蛋白检测试剂盒 FRTZ ELISA Kit |
| Isoborneol | FlightlessⅠ同源物检测试剂盒 FLIⅠ ELISA Kit |
| Besifloxacin HCl | FK506结合蛋白5检测试剂盒 FKBP5 ELISA Kit |
| Omadacycline mesylate | bone morphogenetic proteins，BMPs ELISA Kit |
| Cefotetan | F-框蛋白32检测试剂盒 FBXO32 ELISA Kit |
| Adefovir | GasderminA蛋白检测试剂盒 GS ELISA Kit |
| Prulifloxacin | GasderminB蛋白检测试剂盒 GSDMB ELISA Kit |
| Cefodizime sodium | GasderminD蛋白检测试剂盒 GSDMD ELISA Kit |
| Pyridoxal 5 phosphate | Colivelin TFAGATA结合蛋白1检测试剂盒 GATA1 ELISA Kit |
| CP 80633 | GATA结合蛋白3检测试剂盒 GATA3 ELISA Kit |
| Genethonin1蛋白检测试剂盒 GEN1 ELISA Kit | GATA结合蛋白5检测试剂盒 GATA5 ELISA Kit |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验相关实验
，首先第一个Fmoc氨基酸通过一个酸性接头接到不溶载体树脂上，Fmoc去保护通过用碱处理树脂来完成，一般是Poperidine。 用预先激活或原位激活连接第二个Fmoc氨基酸。要求总多肽合成后，通过TFA分离来除去树脂和去保护。 Fmoc分离 固相多肽合成中多肽分离主要用酸解 Fmoc法用弱酸，比如TFA或TMSBr。各种添加剂， 一般为thiol compound , 水和酚，用来保护多肽的免分离中Carbocation的破坏。 下列保护基与TFA和TMSBr分离相合
/0.5%TFA 溶液数次，然后用0.1%TFA平衡 2.用200ul 0.1%TFA 将冻干样品复溶 3.用ZipTip 吸入压出复溶液大约10次左右 4.用0.1%TFA 冲洗 5.先用Tris-HCl Buffer(50mM/L PH 8.2)冲洗ZipTip，然后用ZipTip缓慢吸入2.55mg/ml SPITC (Tris-HCl Buffer配制)，然后50℃ 水浴 1h 6.取出ZipTip，将多余试剂用0.1%TFA 冲洗干净，衍生后的样品用2.5ul 80%ACN/0.5%TFA
C-18（Millipore ZTC18M096）、TFA(GE HealthCare)、0.2ml and 0.5ml EP tube(eppendorf)、50ml EP 0.5ml EP（Corning） 用具仪器： 真空干燥仪、水浴锅、10μ和200μ移液器、废液缸、制冰和装冰设备、200μ管架、剪刀、能装放置了200μ管管架的塑料盒、200μ管离心机。 准备： 1. 0.2ml EP管三套，MilliQ水和甲醇各涮一遍，真空干燥。 2. 50ml EP管六支，MilliQ
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Colivelin TFA
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