Recombinant Human PCNA

商品属性：

货号	BJ-DB2024	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-261
分子量	28.6 kDa	标签	N-terminal His Tag
应用	Western Blot, ELISA	规格	50μg、200ug、1mg
包装	盒装	分类	重组蛋白

商品介绍：
产品名称：Recombinant Human PCNA
纯度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
性状：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法：Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储：-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
别名：ATLD2, cb16, Cyclin, DNA polymerase delta auxiliary protein, etID36690.10, fa28e03, fb36g03, HGCN8729, MGC8367, Mutagen-sensitive 209 protein, OTTHUMP00000030189, OTTHUMP00000030190, PCNA, Pcna/cyclin, PCNA_HUMAN, PCNAR, Polymerase delta accessory protein, Proliferating cell nuclear antigen, wu:fa28e03, wu:fb36g03
蛋白表达检测方法主要有以下几种：
1、免疫印迹法：免疫印迹法是一种常用的蛋白质表达检测方法，它基于抗体和目标蛋白结合的特异性，通过电泳将样品中的蛋白质分离并转移到膜上，然后使用特异性抗体与目标蛋白结合，最后用化学或光学方法检测结合信号，这种方法可以精确定量目标蛋白的表达水平。
2、免疫组织化学法：免疫组织化学是在组织切片上使用抗体来检测目标蛋白的方法。它通过特异性抗体与目标蛋白在组织切片上的结合来定位和定量目标蛋白在组织中的表达情况。该方法常用于病理诊断和研究特定蛋白在组织中的分布和定位。
3、免疫共沉淀法：免疫共沉淀是一种用于检测蛋白质相互作用的方法，它通过特异性抗体与目标蛋白结合，并利用这个结合复合物来沉淀出与之相互作用的蛋白质被共沉淀的蛋白质可以进一步通过免疫印迹等方法进行检测，从而确定蛋白质之间的相互作用关系。
4、质谱分析法：质谱分析是一种高灵敏度和高分辨率的蛋白质检测方法。它通过将样品中的蛋白质分离、裂解并离子化，然后用质谱仪进行离子质量分析，根据质荷比可以确认蛋白质的身份和序列信息。质谱分析可以用于蛋白质组学研究、鉴定目标蛋白以及分析蛋白质修饰等。

重组蛋白的制备方法：
重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。



重组蛋白操作步骤：
科研重组蛋白的操作步骤主要包括亲和层析纯化、‌溶解冻干粉、‌以及使用SEC进行纯化。‌
亲和层析纯化
对于含有His标签的重组蛋白，‌可以使用镍离子附着的亲和吸附凝胶进行纯化。‌蛋白质会特异性地与吸附凝胶结合，‌然后通过不同浓度的咪唑洗脱缓冲液将目标蛋白洗脱下来。‌
对于含有GST融合标签的蛋白，‌可以使用Glutathione Sepharose 4B凝胶进行纯化。‌通过与还原型谷胱甘肽的作用，‌将目标蛋白从凝胶上洗脱下来。‌
溶解冻干粉
在使用冻干粉之前，‌需要先离心将冻干粉收集于管底。‌离心速度和时间根据使用的离心机而定，‌通常在10,000-12,000 rpm下离心30秒，‌或者在没有高速离心机的情况下，‌使用3000-3500 rpm离心5分钟。‌
离心后，‌将冻干粉复溶于适当的溶液中，‌如PBS或其他缓冲液，‌以溶解冻干粉。‌
使用SEC进行纯化
尺寸排阻色谱（‌SEC）‌是一种基于蛋白分子大小的纯化方法，‌其中蛋白分子不直接与流动相发生作用，‌因此缓冲液的成分不影响色谱柱的分辨率。‌大蛋白的保留时间较短，‌这有助于实现蛋白分离。‌
SEC的分辨率受多种因素影响，‌包括层析柱的床高度、‌流速、‌样本体积及蛋白分子量等。‌ 
公司正在出售的产品：
PEST含核蛋白抗体  PCNP  Ciclopirox ethanolamine
天门冬氨酸甲基转移酶PCMT抗体  PCMT1  Ethyl Caffeate
钙粘蛋白LKC抗体  PCLKC  PF-04691502
磷酸羧化酶2抗体  PCK2  P1075
磷酸烯醇酸羧激酶抗体  PCK1  p-Hydroxybenzaldehyde
TAF15/RBP56  RNA结合蛋白56抗体  Dichlorphenamide-13C6
RBM6  RNA结合蛋白6单克隆抗体  Diazoxide-d3
RBM6  RNA结合蛋白6抗体  Domperidone-d6
RBFOX2  RNA结合蛋白9抗体  (S)-Indoximod
LIN28B  RNA结合蛋白LIN28B单克隆抗体  24-dehydro Cholesterol-d6
CFTR corrector 1  磷酸化核基质结合区结合蛋白1抗体  Phospho-SATB1 (Ser47)
CFTRinh-172  磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体  Phospho-HSL (Ser863)
Calcineurin substrate  磷酸化含SH2结构域接头蛋白B抗体  phospho-SHB (Tyr246)
Carvedilol  磷酸化过氧化酶活化增生受体γ抗体  Phospho-PPAR Gamma (ser273)
C18 dihydro Ceramide (d18:0/18:0)  磷酸化果糖-2,6-二磷酸酶3/磷酸果糖激酶2抗体  Phospho-PFKFB3/PFK2 (Ser467)
Recombinant Human PCNAAcetylcholine Chloride  5-溴脱氧尿嘧啶核苷（增殖标志物）单克隆抗体  BrdU(Proliferation Marker)
8-Hydroxyguanine  5号染色体开放阅读框45抗体  C5orf45
6-Formylpterin  4号染色体开放阅读框17抗体  C4orf17
5-Hydroxy-2'-deoxyuridine  3号染色体开放阅读框30抗体  C3orf30
5α-dihydro Levonorgestrel  2号染色体开放阅读框65抗体  C2orf65