Tuner(DE3)

产品简介：
我们生产的Tuner(DE3)超级感受态细胞，英文名Tuner(DE3) Super Competent Cells，是一种可以精确控制重组蛋白在所有菌体中均一化表达用的E. coli Tuner(DE3)即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化，转化效率可以高达10⁷cfu/μg DNA以上。

很多原核表达系统利用IPTG诱导重组蛋白在BL21菌株中完成表达，这种诱导具有随机效应, IPTG低浓度时只能在少数几个细胞中出现重组蛋白表达。要使所有细胞都表达，往往需要极高浓度的IPTG，且单个细胞内的重组蛋白水平差异较大。这种IPTG浓度带来的开-关效应让重组蛋白的得率难以控制。

Tuner(DE3)菌株解决了该弊端，确保了重组蛋白在所有细胞中均一化表达，且得率和IPTG的浓度呈现一定程度的正相关性。

Tuner(DE3)是lon和ompT蛋白酶缺陷型的B菌株，也是BL21菌株的lacZY基因(半乳糖苷透性酶基因)突变株，此突变导致IPTG以均一速度进入体系中大肠杆菌的每个细胞，产生更加严格、均一的浓度依赖。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于Tuner的染色体上，所以称为Tuner(DE3)，它可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，从而用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达。

Tuner(DE3)菌株的基因型为F- ompT hsdS_B(r_B^-, m_B^-) gal dcm lacY1 (DE3) [1]。

保存条件：

-80℃保存，一年内有效。避免反复冻融，通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。

注意事项：

感受态细胞禁止反复冻融，并应尽可能避免冻融，反复冻融会导致转化效率大幅下降。

感受态细胞融化后，须尽快加入待转化样品，不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间，以免降低感受态细胞的转化效率。

待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%，样品体积过大会导致转化效率下降。

感受态细胞对于温度变化非常敏感，需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。

感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作，不能使用移液枪吹打混匀。

通常仅建议取部分样品用于转化，这样万一遇到转化失败的情况，还留有样品可以再次进行转化。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。