- ￥388 - 1588
- 碧云天（beyotime）
- D1091S
- 国产
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
-80 ℃
- 规格：
10×100μl/50×100μl
| 规格： | 10×100μl | 产品价格： | ￥388.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50×100μl | 产品价格： | ￥1588.0 |
产品简介：
碧云天生产的Tuner(DE3)超级感受态细胞，英文名Tuner(DE3) Super Competent Cells，是一种可以精确控制重组蛋白在所有菌体中均一化表达用的E. coli Tuner(DE3)即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化，转化效率可以高达107cfu/μg DNA以上。
很多原核表达系统利用IPTG诱导重组蛋白在BL21菌株中完成表达，这种诱导具有随机效应, IPTG低浓度时只能在少数几个细胞中出现重组蛋白表达。要使所有细胞都表达，往往需要极高浓度的IPTG，且单个细胞内的重组蛋白水平差异较大。这种IPTG浓度带来的开-关效应让重组蛋白的得率难以控制。
Tuner(DE3)菌株解决了该弊端，确保了重组蛋白在所有细胞中均一化表达，且得率和IPTG的浓度呈现一定程度的正相关性。
Tuner(DE3)是lon和ompT蛋白酶缺陷型的B菌株，也是BL21菌株的lacZY基因(半乳糖苷透性酶基因)突变株，此突变导致IPTG以均一速度进入体系中大肠杆菌的每个细胞，产生更加严格、均一的浓度依赖。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于Tuner的染色体上，所以称为Tuner(DE3)，它可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，从而用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达。
Tuner(DE3)菌株的基因型为F- ompT hsdSB(rB-, mB-) gal dcm lacY1 (DE3) [1]。
保存条件：
-80℃保存，一年内有效。避免反复冻融，通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。
注意事项：
感受态细胞禁止反复冻融，并应尽可能避免冻融，反复冻融会导致转化效率大幅下降。
感受态细胞融化后，须尽快加入待转化样品，不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间，以免降低感受态细胞的转化效率。
待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%，样品体积过大会导致转化效率下降。
感受态细胞对于温度变化非常敏感，需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。
感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作，不能使用移液枪吹打混匀。
通常仅建议取部分样品用于转化，这样万一遇到转化失败的情况，还留有样品可以再次进行转化。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验摘要： 本文主要介绍了各种感受态细胞的区别、用途和特征. Xl1-Blue菌株 基因型： endA1 gyrA96（nalR） thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F'[Tn10 proAB+ lacIq Δ（lacZ）M15] hsdR17（rK- mK+）.
菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶，从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征
（ DE3 ）表达的活性蛋白比其它宿主菌高 10 倍以上。 Origami 宿主菌与氨苄抗性质粒相容，可用于 pET-32 载体，硫氧还蛋白标签能够进一步增强在胞浆内形成二硫键。 TrxB 和 gor 突变可分别用卡那霉素和四环素选择，因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的 pET 质粒。 Origami B 宿主菌来源于 BL21 lacZY 突变株，还带有与原始 Origami 菌株相同的 TrxB / gor 突变。 Origami B 菌株集 BL21 、 Tuner
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