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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
20
- 英文名:
Huperzine C
- CAS号:
163089-71-2
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
5mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
化学性质:
Huperzine C规格:5mg
CAS:163089-71-2
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C15H18N2O
分子量:242.32
溶解度:N/A
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Huperzine C is an alkaloid isolated from Huperzia serrate. Huperzine C is an acetylcholinesterase (AChE) inhibotor, with an IC50 of 0.6 μM. Huperzine C can be used for the research of Alzheimer's Disease[1][2].[1]. Fangfang Jiang, et al. Lycopodium alkaloids from Huperzia serrate. Fitoterapia.. 2019 Sep;137:104277. [2]. Dong-Bo Zhang, et al. Lycodine-Type Alkaloids from Lycopodiastrum casuarinoides and Their Acetylcholinesterase Inhibitory Activity. Molecules. 2014 Jul; 19(7): 9999-10010.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
| 产品名称 | Huperzine C | 产品货号 | CS-01Y76219 |
| 规格 | 5mg | CAS号 | 163089-71-2 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C15H18N2O |
| 分子量 | 242.32 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Huperzine C规格:5mg
CAS:163089-71-2
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C15H18N2O
分子量:242.32
溶解度:N/A
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Huperzine C is an alkaloid isolated from Huperzia serrate. Huperzine C is an acetylcholinesterase (AChE) inhibotor, with an IC50 of 0.6 μM. Huperzine C can be used for the research of Alzheimer's Disease[1][2].[1]. Fangfang Jiang, et al. Lycopodium alkaloids from Huperzia serrate. Fitoterapia.. 2019 Sep;137:104277. [2]. Dong-Bo Zhang, et al. Lycodine-Type Alkaloids from Lycopodiastrum casuarinoides and Their Acetylcholinesterase Inhibitory Activity. Molecules. 2014 Jul; 19(7): 9999-10010.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| Boc-D-Tyr(Et)-OH | RAF mutant-IN-1 |
| RAF265 | 抗小脑检测试剂盒 CE ELISA Kit |
| RAF709 | 抗线粒抗M2亚型检测试剂盒 AMA-M2 ELISA Kit |
| Rafoxanide | 抗纹状检测试剂盒 ST ELISA Kit |
| RAGE antagonist peptide | 抗细胞膜DNA抗检测试剂盒 cmDNA ELISA Kit |
| RAGE antagonist peptide TFA | 抗胃壁细胞抗检测试剂盒 AGPA/PCA ELISA Kit |
| Ralaniten | 抗尾状核检测试剂盒 CN ELISA Kit |
| Ralaniten triacetate | APC ELISA Kit |
| Ralfinamide | 抗抗检测试剂盒 HAMA ELISA Kit |
| Ralfinamide mesylate | 抗心肌β1受检测试剂盒 MB1R ELISA Kit |
| Raloxifene HCl | 抗信号识别颗粒54kDa蛋白检测试剂盒 SRP54 ELISA Kit |
| Raloxifene-d4 (hydrochloride) | 抗信号识别颗粒抗检测试剂盒 SRP ELISA Kit |
| Raltegravir (MK-0518) | Huperzine C抗胸腺细胞球蛋白检测试剂盒 ATG ELISA Kit |
| BI-2545 | 抗血小板抗IgG检测试剂盒 PA-IgG ELISA Kit |
| 抗胰岛素受抗检测试剂盒 AIRA ELISA Kit | 抗血小板抗IgM检测试剂盒 PA-IgM ELISA Kit |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验相关实验
广义的细胞色素 c是含有血红素 c的细胞色素之总称。通常是指主要存在于高等动植物、酵母、霉菌等线粒体中的细胞色素 c,起着传递电子的作用。为分子量约 1.3万的碱性蛋白质,还原型的吸收带为 550、 520、 415毫微米,氧化型为 407毫微米。α 因此很早便被研究,并获得结晶。不仅一级结构而且立体结构也已清楚(图 1)。其结构基本上是生物界共有的。由细胞色素 c氧化酶〔细胞色素( a+ a3 )复合体〕氧化。在呼吸链中从细胞色素 c开始接受电子,各种还原酶都已清楚
也称为底土层,一般不受成土因子的影响,因而是一般不具有 A层和 B层特性的土壤层次,在 A层或 B层发达的土壤中,在这些层次之下存在有 C层。
主要显示着丝粒结构异染色质, 及其它区段的异染色质部分。标本可用酸 (HCl)及碱〔Ba(OH)2 〕变性处理, 再经2xSSC在60℃中温育1小时, 最后用Giemsa染料染色显带。
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
Huperzine C
¥600 - 3200









