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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存:
133
- 英文名:
MHCC-97H-GFP 细胞
- 运输方式:
快递运输
- 规格:
1*10^6

| 一、基本信息 |
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| 细胞名称 |
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| 细胞规格 |
1*10^6 |
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| 细胞英文 |
MHCC-97H-GFP细胞 |
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| 细胞冻存 |
液氮冻存 |
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| 干冰运输 |
2ml冻存管 |
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| 活细胞运输 |
T25瓶 |
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| 培养基 |
冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO |
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| 存接收后处理 |
干冰运输,收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏 |
|
| 收到细胞后,发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照与我们联系 |
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| 发货方式 |
复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) |
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| 供应范围 |
仅限于科研实验使用,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 |
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| 复苏接收后处理 |
1. 收到细胞后,请首先检查培养瓶是否破损或漏液,培养液是否混浊 |
2. 如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们 |
| 3. 75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后,在显微镜下确认细胞状态并拍 照100倍和200倍的照片 |
4. 若有贴壁细胞脱落,可收集上清离心,将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或 培养皿中 |
|
| 建议收到当天不要消化处理,如果细胞长满90%,可选择传代处理 |
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| 您收到细胞3天内没有反馈相关问题,出现的细胞问题将不提供免费重发服务 |
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| 二、细胞培养操作及注意事项 |
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| 细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 |
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| ① |
弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次。 |
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| ② |
加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化。 |
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| ③ |
1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止。 |
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| ④ |
将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清。 |
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| ⑤ |
用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基。 |
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| ⑥ |
悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 |
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| 细胞复苏 |
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| ① |
将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 |
|
| ② |
在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 |
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| 细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 |
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| ① |
弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)。 |
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| ② |
1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化。 |
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| ③ |
将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞。 |
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| ④ |
将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。 |
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| 三、售后服务 |
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| 细胞予重发 |
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。 2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。 3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。 4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。 5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。 6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。 |
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| 细胞不重发 |
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。 2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。 3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。 4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。 5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。 6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。 |
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文献和实验工作。 --- 一、先确定载体形式:你的细胞有没有 Cas9 这是选型的第一道分叉,弄错会直接导致实验无效。 形式 A:All-in-one(gRNA + Cas9 在同一载体) 适用于没有 Cas9 稳转株的细胞; 一次感染即可完成全部元件递送; 载体较大(Cas9 约 4.1 kb),病毒滴度通常偏低; Cas9 会持续表达。 形式 B:只带 gRNA 的载体 适用于已有 Cas9 稳转株的细胞; 载体小,滴度高,感染效率高; 是文库筛选的标准形式。 常见错误:在没有 Cas
-SY5Y、Hela、Ej、T24、HepG2 和 MHCC-97 H 等多种细胞系中完成验证吉赛生物 circRNAs 表达载体有如下特征: 1)过表达效率高。circRNAs 表达载体上加有吉赛生物专利技术的上下游环化框架,验证过的所有 circRNAs 都能显著过表达 50 倍以上,最高可过表达 800 倍。 2)序列环化准确。环化框架内部引入吉赛生物专利技术的环化介导序列,有效保证目标 circRNAs 的线性序列准备环化,验证过的所有 circRNAs 都能准确环化,无碱基添加或缺失。
联合免疫缺陷 (severe combined immunodeficiency disease ,SCID) 小鼠肝脏后,在整个实验过程中(3 周) 小鼠肝脏中均有GFP 表达。利用肝成纤维细胞,在大鼠中的研究得到了相似的结果。当利用肝脏特异的白蛋白增强子/ 启动子时, GFP 在大鼠[9 ]的肝脏中可长期稳定表达。同时, 将携带人凝血因子IX 的LV 注入 SCID 鼠体内,可得到治疗水平的人凝血因子IX ,并稳定表达一年[10 ] 。LV 经过改造在体外可有效转导原代培养的大鼠肝细胞、Hep G2 肝癌细胞[11
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MHCC-97H-GFP 高转移潜能肝癌细胞GFP稳转株.pdf 附 (下载 0 次)
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