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1-3年
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999
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亦高生物
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F4137-1ML

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文献和实验免疫印记技术(Western-blotting technique)
。其余部分置于封闭液中室温振摇1小时;③取出后置于用封闭液稀释为1:1000的HRP/兔抗鸡IgG-HRP结合物中,室温振摇1小时;④取出膜用洗涤液洗6次、蒸馏水1次、双蒸水1次,每次30秒;⑤最后将膜浸入至底物溶液中直至适中的颜色出现;⑥用蒸馏水、双蒸水冲洗终止反应。 三、结果判定 SO7基因表达产物为26KD,所以在蛋白Marker 显示的26KD处应有一条目的带。但如果所用的抗血清不纯,就有可能在还有其它非特异性条带出现,这可能是菌体
约3ml。 c、待琼脂凝固后,用打孔器在琼脂板上打出梅花形的小孔(中央1孔,周围6孔),然后封底。 d、向中央孔加入抗小鼠IgG类或亚类抗血清,周围孔加入待检样品;加样后将琼脂板放入湿盒,置37℃水浴箱中12-24小时或4℃过夜,观察结果。 (B) ELISA法 该法不需要将样品浓缩,而且比免疫扩散法更快地得到结果。 材料: a、ELISA所需用溶液同杂交瘤细胞的筛选一节。 b、酶标板。 c、山羊抗鼠Ig;兔抗小鼠Ig类及亚类特异性血清;HRP结合的山羊抗兔Ig等。 d、待检杂交
6C5)能够与鱼、蛙、鸡、兔、小鼠、大鼠及人组织来源的GAPDH反应,但不能与酵母GAPDH反应。一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。 图示: A-G分别表示不同实验小鼠心脏蛋白(上样量50ug),兔抗小鼠Akt抗体(康成生物Cat#KC-5A01)检测心脏组织匀浆中Akt水平。加入兔二抗(康成生物Cat#KC-RB-035,稀释比例为1:5,000)时同时加入HRP标记的抗GAPDH单抗(稀释比例为1:10,000,康成生物Cat#KC-5G5)。采用化学
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